Optimización de métodos de extracción de DNA para la amplificación de marcadores STR en Pinus taeda.

FONSECA MI, TORO AA, WALANTUS HL, ZAPATA PD.

Pergamino, Argentina

Congreso; 36º Congreso Argentino de Genética; 2007

SAG

La forestoindustria de Misiones cuenta con 330.000 ha de plantaciones forestales, principalmente pinos y araucarias. Sin embargo, no se ha alcanzado el nivel de desarrollo biotecnológico que conjugue calidad genética con características fenotípicas maderables. Los microsatélites (STR) informan la variabilidad en la población de estudio analizándose su posible asociación con rasgos fenotípicos deseables que favorezcan su uso forestal. Los STR son secuencias de 2-6 pb repetidas en tándem distribuidos por el genoma y flanqueadas por secuencias altamente conservadas. Su variabilidad se debe al cambio del número en unidades de repetición, analizándosela fácilmente por PCR usando cebadores específicos de secuencias únicas que flanquean los STRs. La identificación y caracterización molecular de la diversidad genética de plantas involucran métodos rápidos y precisos de extracción de DNA. Las hojas de las coníferas contienen polifenoles, ácidos y resinas que comprometen la extracción e inhiben la acción de la Taq polimerasa. Se evaluaron diferentes métodos de extracción de DNA, a partir de tejidos de Pinus taeda, utilizando bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB), para obtener cantidad y calidad adecuada de DNA y caracterizar a nivel molecular diferentes poblaciones utilizando STRs. Las diferencias estuvieron en la composición del tampón de extracción y en la purificación del DNA. Utilizándose cebadores RIPPTs 1, 31, 65, 77 y 79 (BV683040, BV683043, BV683047, BV683052, BV683053) se observaron bandas de 263, 261, 142, 175 y 153 pb, respectivamente. Nuestros resultados indican que el método de extracción de DNA utilizado es eficiente para el análisis de STRs en estudios poblacionales de Pinus taeda. Taq polimerasa. Se evaluaron diferentes métodos de extracción de DNA, a partir de tejidos de Pinus taeda, utilizando bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB), para obtener cantidad y calidad adecuada de DNA y caracterizar a nivel molecular diferentes poblaciones utilizando STRs. Las diferencias estuvieron en la composición del tampón de extracción y en la purificación del DNA. Utilizándose cebadores RIPPTs 1, 31, 65, 77 y 79 (BV683040, BV683043, BV683047, BV683052, BV683053) se observaron bandas de 263, 261, 142, 175 y 153 pb, respectivamente. Nuestros resultados indican que el método de extracción de DNA utilizado es eficiente para el análisis de STRs en estudios poblacionales de Pinus taeda.