FERTILIZACIÓN HETERÓLOGA DE ÓVULOS BOVINOS CON SEMEN DE BÚFALO

SCARNATTO R; KONRAD J.L; BENTIVOGLIO A.B; BANDEO A; VALLEJOS N; MALDONADO VARGAS, P.

Villa Carlos paz

Simposio; 14 SIMPOSIO INTERNACIONAL DE REPRODUCCION ANIMAL ? IRAC 2022; 2022

Instituto de reproducción animal córdoba

FERTILIZACIÓN HETERÓLOGA DE ÓVULOS BOVINOS CON SEMEN DEBÚFALOScarnatto R.E.1-2 Konrad J.L.2-3 Bentivoglio A.B.1 Bandeo A.2-3 Vallejos N.3-4 MaldonadoVargas P.21Preñatec S.R.L, Corrientes, Argentina.2Instituto de Biotecnología de Reproducción Animal (IBRA), Facultad de CienciasVeterinarias, Universidad Nacional del Nordeste (UNNE), Corrientes, Argentina. 3ConsejoNacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Argentina. 4SecretariaGeneral de Ciencia y Técnica, Universidad Nacional del Nordeste (UNNE), Corrientes,Argentina.*E-mail: raulscarnatto@gmail.comLa fertilización in vitro en búfalos podría ser utilizada para investigar las tecnologíasaplicadas sobre el semen de esta especie y sus implicancias sobre la fertilidad, sin embargo,la obtención de ovarios de búfalas en el matadero es limitada, debido a la baja tasa de faenaproducto de su larga vida productiva y alta tasa de retención de hembras, siendo de interéspoder utilizar la abundante provisión de ovarios de vacas como sustituto para la fertilizaciónin vitro del semen de búfalo. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la factibilidad delograr fertilizar óvulos bovinos con semen de búfalo, esto permitiría desarrollar futurasinvestigaciones sobre semen de búfalo (fresco o crio-preservado) sobre una matriz de mayordisponibilidad. Se obtuvieron ovarios bovinos de matadero y se trasladaron a temperaturaambiente hasta el laboratorio (Preñatec SRL) en un lapso menor a tres horas desde lafaena. Una vez en el laboratorio se procedió a aspirar los folículos con una bomba de vacíopara aspiración folicular (WTA), con una presión de vacío de 76 mmHg y aguja 40/12, seaspiraron 3 o 4 ovarios y se dejó decantar el contenido en el tubo de 50 ml durante 5minutos en baño maría seco, transcurrido este tiempo se procedió a tomar del fondo deltubo 2 ml y colocados en una placa cuadriculada (100mm x 20mm) que contenía 30 ml dePBS. Luego se realizó la búsqueda de los óvulos en guarda griega, todos los ComplejosCúmulos Oocitarios (CCOs) calidad I (I-IV) encontrados fueron aislados y colocados entubos de 5 ml con 400 µl de medio de maduración y 300 µl de aceite de parafina,previamente estabilizados en una atmosfera de 5% de CO2. Se prepararon 9 tubos con 31estructuras en promedio cada uno y transcurridas 24 hs. de maduración en incubadora a38,5 °C, 5% CO2 y 100% de humedad, estos se destinaron aleatoriamente para serfertilizados con semen bovino (5 tubos) o semen de búfalo (4 tubos). El semen utilizado, sepreparó por medio de la técnica de lavado con medio FIV y se co-incubo en gotas de 100 µlen dicha incubadora. Después de 18 hs. se realizó el cultivo en medio SOF, denudando lasestructuras por pipeteo mecánico y posteriormente se mantuvo los presuntos cigotosdurante 6 días en ambiente de 5% de CO2, 5% de O2 y 90% de N2. Los días 3 y 5 postfertilización (D3 y D5) se contabilizaron las estructuras que continuaban dividiéndose y sedescartaron las restantes, el día 7 se contabilizaron y vitrificaron los embriones que habíanllegado al estadio de blastocisto expandido con calidad 1(I-IV). Con los datos obtenidos, serealizó un análisis de ANOVA, no observándose diferencia estadísticamente significativa(p>0,05) en las distintas variables, (INFOSTAT 2022). Los resultados se presentan en lasiguiente tabla:SEMEN OVULOSnCIV%D3%D5%D7%BOVINO 150 91 % (136/150) 23 % (35/150) 19 % (28/150) 15 % (23/150)BUFALO 139 96 % (134/139) 24 % (34/139) 9 % (12/139) 2 % (3/134)TOTAL 289 93 % (270/289) 24 % (69/289) 14 % (40/289) 9 % (26/289)Se concluye que es factible utilizar óvulos bovinos como matriz de fecundación para elsemen de búfalo, podrían utilizarse otros métodos para determinar fertilización propiamentedicha (tinciones), teniendo en cuenta que se consideró como fertilizado lo que continúo sudesarrollo. La evolución hasta blastocisto plantea otras líneas de investigaciones deprovecho para ambas especies.