LA SENSIBILIZACIÓN A LA APOPTOSIS INDUCIDA POR FAS EN LA ESTEATOSIS HEPÁTICA ES DEPENDIENTE DE JNK

BARREYRO FJ; MARUCCI RS

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Congreso; XVII Congreso Argentino de Hepatologia; 2013

Asociación Argentina para el Estudio de las Enfermedades del Higado

La esteatosis hepática, es una característica cardinal de la esteatohepatitis no alcohó-lica, y un factor de mal pronóstico en varias enfermedades hepáticas. Recientemente,el receptor de la muerte Fas ha sido implicado en la progresión de esteatosis a estea-tohepatitis. Por lo tanto, nuestro objetivo fue examinar el efecto de la esteatosis en lacitotoxicidad mediada por Fas en cultivos de hepatocitos. MÉTODOS: La esteatosisfue inducida por tratamiento con el ácido graso monoinsaturado, oleico (OA) y el ácidograso saturado, esteárico (SA) en cultivo de la línea celular HepG2. Los hepatocitosesteatóticos fueron tratados con Fas recombinante humano (150ng/ml). La apoptosisse evaluó por tinción nuclear con DAPI y medición de actividad de caspasa 3/7. Laexpresión del receptor de Fas se examinó mediante análisis de inmunoblot y PCR entiempo real cuantitativa. RESULTADOS: El tratamiento con los ácidos grasos OA ySA en las células HepG2 incrementan la sensibilidad a la citotoxicidad mediada porFas, donde se observa que el tratamiento con Fas solo indujo apoptosis en 12% delas células después de 2 horas de tratamiento. En contraste, la incubación OA el cualse caracteriza por ser mínimamente tóxico (apoptosis de 11%) condujo a un aumentomayor de 5-veces en la apoptosis mediada por Fas (61%), esta observación también fuehallada bajo la incubación del ácido graso tóxico, esteárico. La incubación con OA seasoció a un aumento de la expresión del receptor Fas tanto a nivel del mRNA comotambién a nivel proteico siendo dosis dependiente. El ?knock down? de la expresión deFas con siRNA-Fas abolió la sensibilización por OA. Debido al rol de los ácidos grasosen activar JNK, nos dirigimos a determinar si la activación de JNK podría estar implica-da en la sensibilización a la apoptosis inducida por OA. Se utilizó el inhibidor de JNK,SP600125, donde se observó que la inhibición de JNK evitó la sensibilización a Fasmediada por OA. En conclusión, tanto el ácido oleico y ácido esteárico sensibilizan alos hepatocitos a citotoxicidad mediada por Fas. Esta sensibilización se produce a travésde la regulación positiva de la expresión del receptor Fas de una manera dependiente deJNK. Estos datos proporcionan nuevos conocimientos sobre los mecanismos celularesespecíficos que imparten sensibilidad a la apoptosis en los hepatocitos esteatósicos yestablece objetivos para las intervenciones terapéuticas