DISFUNCIÓN MITOCONDRIAL EN MODELOS MURINOS DE EN-FERMEDAD HEPÁTICA GRASA DE ETIOLOGÍA NO ALCOHÓLICA:ROL DEL ÓXIDO NÍTRICO SINTASA MITOCONDRIAL

BARREYRO FJ; FINOCCHIETTO PV; HOLOD S; CARRERAS MC; PODEROSO JJ

Rosario

Congreso; Congreso Argentino de Gastroenterología y Endoscopía digestiva 2011; 2011

Sociedad Argentina de Gastroenterología

La enfermedad hepática grasa de etiología no alcohólica (EHGNA) primaria vincu-lado a la obesidad y resistencia a la insulina, es la causa más frecuente de enferme-dad hepática en la actualidad. Varios trabajos recientes indican que la disfunciónmitocondrial juega un papel crítico en la iniciación y progresión de la EHGNA,describiéndose una estrecha relación entre el aumento en la nitración de proteínascon la disfunción mitocondrial. Trabajos previos de nuestro grupo han demostradoque la insulina regula la síntesis de óxido nítrico (NO) en las mitocondrias. La NOsintasa transloca a la mitocondria (mtNOS), donde sintetiza NO. En las mitocon-drias, la concentración de NO modula la transferencia de electrones, la captaciónde oxigeno y la producción de especies reactivas de oxígeno. Por lo tanto nuestroobjetivo fue determinar la actividad y expresión de mtNOS en el hígado de los mo-delos murinos de EHGNA. MÉTODOS: Se utilizaron dos modelos de EHGNA,1) el ratón ob -/- deficiente en leptina, y 2) el C57BL/6J como wild-type (WT)alimentados con una dieta alta en grasa (HFD). Las mitocondrias hepáticas fueronpurificadas. La síntesis NO mitocondrial se determinó por citometría de flujo conDAF. La expresión de mtNOS se evaluó por inmunoblot, QRT-PCR y su locali-zación por inmunomicroscopía electronica. Se determinó el consumo de oxígenomitocondrial (VO2), el potencial de membrana (Δ′′) y la actividad de los complejosrespiratorios mitocondriales. Los MRC se separaron por BN-PAGE, y 3-nitrotiro-sina (3NT) fue detectada por inmunoblot. RESULTADOS: 1) Los ratones ob -/- yratones alimentados con HFD tienen un aumento significativo de la expresión yactividad de mtNOS. 2) El Δ′′mitocondrial y el VO2 se redujo significativamente(-32%, p <0,05). 3) La actividad del Complejo I se redujo notablemente (-61%, p<0,05), no hubo cambios significativos en la actividad de los Complejos II-III y IV.4) De acuerdo con la baja actividad, el Complejo I presenta aumento de 3 veces de3NT. 5) EL tratamiento con leptina normaliza la actividad de mtNOS, la bioener-gética mitocondrial y la actividad del Complejo I, con una significativa reducciónen 3NT. CONCLUSIONES: a) las mitocondrias de hígado de los ratones ob -/- yWT con HFD están expuestos a altas concentraciones de NO lo que conduce a unaumento en la nitración del Complejo I y reducción de su actividad, b) Del mismomodo, más del 60% de inhibición Complejo I contribuye a la baja captación de O2,c) El incremento de NO depende de la alta expresión de mtNOS y, probablemente,indica que la insulina aumenta la actividad mtNOS y la leptina reduce la actividadmtNOS, d) por lo tanto, en estos modelos murinos de EHGNA, el equilibrio entrela sensibilidad de leptina e insulina tienden a mantener el hipometabolismo mito-condrial y a favorecer la esteatosis hepática