Estudio teórico-experimental de nuevos inhibidores de la proteína quinasa BRAF

MORELLATO RUGGIERI L; CAMPOS L; RODRIGUEZ Y; CASTRO M; GARIBOTTO F; ENRIZ D; ALVAREZ SE

Simposio; Simposio Internacional Programa Raices; 2016

Alrededor del 50% de los pacientes con melanoma expresan la proteína quinasa mutante BRAFV600E, cuya activación constitutiva induce la proliferación a través de la activación de ERK. Vemurafenib es un inhibidor de BRAF que se utiliza clínicamente para el tratamiento del melanoma metastásico en pacientes BRAFV600E. Considerando que la eficacia del fármaco es limitada por el desarrollo de resistencia, el objetivo de este trabajo es analizar el efecto de nuevos compuestos con potencial actividad inhibitoria de BRAF. Los nuevos compuestos fueron seleccionados en base a un estudio de modelado molecular de BRAF con Vemurafenib, en el cual se utilizaron técnicas de docking combinadas con simulaciones de dinámica molecular. Para el estudio experimental utilizamos como modelo células de melanoma Lu1205, que expresan BRAFV600E, y se analizó la fosforilación de ERK como una medida de la actividad de BRAF. Varios compuestos disminuyeron la fosforilación de ERK a concentraciones de 50 y 10 μM. Interesantemente, derivados 6-OH-2-carboxanilida obtenidos mediante síntesis química fueron los compuestos más activos presentando actividad a una concentración de 1 M. Resultados preliminares con la técnica de MTT sugieren que las drogas empleadas a 10 uM disminuyen la viabilidad celular. Teniendo en cuenta que el tratamiento de las células Lu1205 con Vemurafenib por 2 horas induce reducción en los niveles de pERK mientras que el tratamiento prolongado por 72 horas produce reactivación de la vía y aumento de pERK, estudios adicionales son necesarios para determinar si los compuestos ensayados se comportan en forma similar.