INVESTIGADORES
RIVERO Mariana Alejandra
congresos y reuniones científicas
Título:
PERFILES GENÉTICOS DE ADN POLIMÓRFICO AMPLIFICADO AL AZAR (RAPD) DE ESCHERICHIA COLI O157:H7 AISLADO DE MATERIA FECAL DE NIÑOS
Autor/es:
RIVERO, M A; LUCCHESI, P M A; PARMA, A E
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Congreso; XI Congreso Argentino de Microbiología; 2007
Institución organizadora:
Organizado por Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
Escherichia coliO157:H7 es uno de los más importantes agentes etiológicos del Síndrome Urémico Hemolítico (SUH), principal causa de insuficiencia renal aguda y segunda causa de insuficiencia renal crónica en la infancia. El SUH generalmente es precedido por un cuadro de diarrea, de comienzo acuosa, que posteriormente se torna sanguinolenta.El objetivo de nuestro trabajo fue estudiar la diversidad genética existente entre cepas de Escherichia coli O157:H7 aisladas de muestras de materia fecal de niños que presentaron diarrea sanguinolenta, mucosanguinolenta y/o SUH y que no se encontraban relacionados epidemológicamente.Las cepas, previamente aisladas y caracterizadas genéticamente mediante la técnica de PCR, se cultivaron en medio Luria Bertani a 37ºC durante 18 h con agitación. Se ajustó la densidad óptica a 600 nm de una alícuota del cultivo. Las bacterias se sedimentaron por centrifugación, se resuspendieron y el ADN se liberó por ebullición. Para la reacción de RAPD se utilizaron los “primers” M13 y 970-11, con un termociclado de 5 min a 94ºC seguido de 40 ciclos de 1 min a 94ºC, 1 min a 50ºC y 1 min a 72ºC. Cada perfil de RAPD se definió por la presencia o ausencia de bandas visualizadas en gel de agarosa al 1,8%Con el "primer" M13 se pudieron observar diferentes perfiles de RAPD. Se los denominó A, A1, A2, A3, A3a, A3b y B siendo los del grupo A similares entre sí. Con el “primer” 970-11 no se encontraron diferencias entre las muestras analizadas. El “primer” 970-11 no permitió discriminar los aislamientos. Con el "primer" M13, en cambio, pudieron obtenerse perfiles diferenciables, independiente del número de bandas. Las diferencias mayores se observaron entre los perfiles del grupo A y B. Es interesante notar las mínimas diferencias entre perfiles genéticos de algunas muestras no relacionadas en tiempo y espacio