Expresión y función del canal de protones Hv1n líneas celulares de origen T.

PAULINA FINOCHIETTO; CLARA VENTURA; VERONICA MILESI; FLORENCIA CAYROL

Buenos Aires

Congreso; XXXV Jornadas multidisciplinarias de ocología; 2023

Instituto de oncología Angel H. Roffo

El canal Hv1 es una proteína que media el flujo de protones hacia el espacio extracelular. Previamente demostramos su rol en la regulación del pH intracelular (pHi) y la apoptosis de células tumorales de origen T. Además, observamos la expresión de una isoforma corta en células tumorales mamarias. En este trabajo, evaluamos la expresión y actividad del canal Hv1 en dos líneas celulares derivadas de linfomas T humanos (Hut78 y Karpas299) y su rol en la regulación del pHi y la proliferación celular. La expresión del canal Hv1 se analizó a nivel de ARNm, usando la base de datos cBioPortal, y a nivel proteico, mediante citometría de flujo utilizando anticuerpos específicos que permiten discriminar las isoformas del canal. La funcionalidad se evaluó mediante Patch Clamp en configuración de célula entera. El rol del canal en la regulación del pHi se determinó por citometría de flujo utilizando la sonda sensible al pH BCECF-AM, en presencia y ausencia de un inhibidor específico del canal (ClGBI, 10 μM). La participación del canal en la proliferación celular se evaluó mediante la determinación del tiempo de duplicación celular (Td) en presencia de diferentes concentraciones de ClGBI o vehículo.Nuestros resultados demuestran que las células Hut78 expresan mayores niveles de ARNm del canal, en relación a las células Karpas299 (p