Modelos murinos para comprender la Enfermedad de Chagas Oral y desarrollar estrategias profilácticas.

FLORENCIA PACINI; BRENDA DINATALE; CAMILA BULFONI BALBI; ANA R. PÉREZ

Congreso; Expo Bioterio Virtual; 2020

La Enfermedad de Chagas oral (EChO) es causada por la ingestión de alimentos contaminados con el parásito Trypanosoma cruzi. Dado que existe escasa información acerca de la respuesta inmune que se genera cuando el parásito ingresa a través de la vía digestiva, nos hemos propuesto como objetivos: Obj1) desarrollar dos modelos murinos de infección oral a fin de caracterizar el desarrollo de la respuesta inmune que se desencadena; Obj2) evaluar un modelo de inmunización profiláctica capaz de contrarrestar la infección cuando el parásito ingresa por vía oral. Para el OBj1, hembras BALB/c fueron infectadas en espacios anatómicos diferentes: En el primer modelo, los parásitos son depositados sobre la mucosa bucal (MB), mientras que en el segundo son depositados a nivel gástrico por ?gavage? (MG), evitando de esta manera la mucosa bucal. Posteriormente se evaluó parasitemia, mortalidad, citocinas y daño tisular. Para el Obj2, el esquema profiláctico consistió la administración nasal de una formulación que contenía transialidasa-(TSr) emulsionada en el adyuvante di-AMP-cíclico (3 dosis espaciadas cada 15 días). Luego los animales fueron desafiados por vía oral con una dosis no letal de T. cruzi y se analizó el correlato de inmunidad (parasitemia, anticuerpos, respuesta celular, score clínico). Se utilizaron con fines comparativos animales no inmunizados (NI). Los animales fueron mantenidos en gabinetes con filtros HEPA y se siguieron las normal del CICUAL institucional para asegurar el bienestar animal y evitar el sufrimiento innecesario en los animales (Res.N°:6698/2014). Resultados: Los animales infectados en la MB desarrollaron una enfermedad más severa en términos de parasitemia y mortalidad que los infectados por vía MG. Asimismo, ambos modelos presentaron un patrón de expresión de citocinas y daño tisular diferente. La inmunización redujo visiblemente la parasitemia, el score clínico y el daño tisular tras el desafío con T. cruzi en la MB. La protección lograda por la vacuna experimental se asoció a un incremento en los niveles de anticuerpos anti-TS tanto a nivel sérico (IgG2a) como en heces (IgA), mayor respuesta de hipersensibilidad retardada (realizada en la almohadilla plantar una vez finalizada la inmunización) y un aumento en la proporción de linfocitos T-CD8+IFN-γ+. En conjunto, estos estudios, no sólo evidencian que los distintos mecanismos de defensa a nivel de la mucosa oral llevan a un cuadro y desenlace diferente de la enfermedad experimental, sino que también que es posible atenuar las consecuencias de la EChO a través de un esquema profiláctico a nivel de mucosa nasal.