Efectos del inhibidor de proteasa tipo germina (IPG) sobre la formación de biofilm bacterianos en plántulas de tomate

RODRÍGUEZ SIMÓN CARLOS NORBERTO; MENDIETA JULIETA RENE; NERCESSIAN DEBORA

Mar del plata

Congreso; Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2018

Los biofilms son comunidades de células multi-especificas organizadas en cúmulos y adheridas mediante polímeros extracelulares. En éstas los microorganismos pueden especializarse y adoptar características bioquímicas que no presentan en su forma planctónica, lo que puede explicar fenómenos como la patogenicidad e interacciones benéficas entre microorganismos y plantas.En nuestro laboratorio estudiamos una proteína llamada IPG (Inhibidor de proteasa tipo germina), la cual posee múltiples actividades enzimáticas y un posible rol en la defensa ante microorganismos patógenos. Dada la importancia subyacente en la formación de biofilm, para la interacción entre plantas y microorganismos hemos decidido investigar los posibles efectos de IPG en este proceso. Para ello, se determinó la formación de biofilm en presencia o ausencia de IPG de la bacteria fito-patógena Pseudomonassyringaey la bacteria promotora del crecimiento vegetal Sinorhizobiummeliloti sobre superficies inertes mediante la técnica de tinción por cristal violeta e indirectamente sobre raíces de plantas de tomate (Solanumlycopersicum) frente a S. melilotipor microscopia óptica de fluorescencia con el colorante naranja de acridina (0.01%), obteniendo resultados prometedores sobre la acción de nuestra proteína como regulador exhibidos en los congresos BER(2016) y SAMIGE (2017). Actualmente, estamos evaluando de forma cuantitativa la modulación de éstas interacciones, en presencia o ausencia de IPG, sobre raíces de S. lycopersicummediante recuentos de unidades formadoras de colonia donde la concentración máxima alcanzada para S. meliloti se presenta en conjunto a IPG, mientras que, para P. syringae conjunto a IPG presenta su concentración mínima. También se determinarán los efectos de las interacciones sobre la planta mediante mediciones de parámetros fisiológicos (peso fresco de cotiledones, raíces y largo de las mismas) e inmunoquímicos, mediante western blot, revelando contra proteínas indicadoras de la respuesta de defensa (ej, glucanasa) y se analizará el mecanismo de acción de nuestra proteína al variar el pH del medio por encima y por debajo del PI de la misma.