Rol de cobre en el eje gonadotrópico bovino: acción del mineral sobre la hipófisis

OGEAN, BN; ANCHORDOQUY, JM; BALBI, M; GARCIA, MN; FARNETANO, NA; FABRA, MC; CAMPAGNA, AA; NIKOLOFF, N; FURNUS, CC; ANCHORDOQUY, JP

Jornada; Jornada de Investigación 2022; 2022

El cobre (Cu) es un mineral esencial cuya deficiencia se ve asociada a fallas reproductivas en los mamíferos. Estemineral ingresa a la célula por medio de un transportador especifico denominado CTR1. Se ha demostrado en especiescomo la rata, el cerdo y el conejo que el Cu induce la liberación de hormona liberadora de gonadotrofina (GnRH),encargada de regular la actividad ovárica. Sin embargo, la acción de este mineral sobre la hipófisis, otro componentedel eje gonadotrópico, es menos conocida.Objetivos:El objetivo del presente trabajo consistió en evaluar el efecto de la suplementación con Cu durante el cultivo deexplantos de hipófisis sobre la concentración de hormona foliculoestimulante (FSH) y luteinizante (LH) en el medio decultivo. Además, se evaluó la inmunolocalización de CTR1 en las células hipofisiarias cultivadas o no con Cu.Materiales y métodos:Se obtuvieron de frigorífico porciones anteriores de hipófisis de bovino, las cuales se cortaron para obtener trozos deaproximadamente 3 x 3 x 3 mm. Los explantos se asignaron aleatoriamente a una de las siguientes condiciones decultivo (tratamientos): medio TCM-199 suplementado con 60 µg/dL de Cu (Cu), o TCM-199 sin suplementación(Control). La concentración de Cu utilizada en este trabajo fue establecida previamente. Los explantos se cultivaron a38 °C en una atmósfera gaseada con 5% de CO2 en aire con humedad a saturación durante 5 h. Finalizado el tiempo decultivo, se determinó la concentración de FSH y LH en el medio mediante RIA. Para la inmunolocalización de CTR1,una vez finalizado el cultivo se fijaron los explantos en formalina, se incluyeron en parafina, se cortaron secciones de 5µm, se desparafinaron en xileno y se rehidrataron. Los preparados se incubaron con el anticuerpo primarios anti CTR1.Para la detección se utilizó como cromógeno el sistema EnVision, El modelo estadístico incluyó el efecto aleatorio delbloque (replica, n=3) y el efecto fijo del tratamiento (Control vs. Cu). El efecto del Cu sobre la concentración de FSH yLH se analizó mediante un análisis de regresión lineal utilizando el procedimiento MIXED de SAS. Para el análisis dela tasa de células inmunopositivas se utilizó una regresión logística utilizando el procedimiento GLIMIX (SAS). Losresultados se expresaron como medias de mínimos cuadrados ± SEM. La significación estadística se estableció en p0,05). Por otro lado, se detectó un mayor porcentaje de células CTR1positivas cuando estas fueron incubadas en presencia de Cu (6,76±0,3 y 3,18±0,2 % de células positivas en Cu yControl, respectivamente; p ˂ 0.05).Conclusiones:La presencia de 60 µg/dL de Cu durante de cultivo de explantos de hipófisis aumenta la concentración de LH en elmedio y el porcentaje de células CTR1 positivas. Estos resultados sugieren que el Cu juega un papel importante en lafuncionalidad de las células gonadotropas de la hipófisis bovina.