La Fibronectina (Fn) estimula la capacitación de espermatozoides humanos y su liberación desde las células epiteliales oviductales (CEO) de bovino

MARTÍNEZ, EDUARDO; PEREZ-MARTÍNEZ, SILVINA; MORALES, PATRICIO; DÍAZ, EMILCE

Valdivia

Congreso; XXIV Reunión Anual de la sociedad chilena de reproducción y desarrollo; 2013

Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo.

LA FIBRONECTINA (FN) ESTIMULA LA CAPACITACIÓN DE ESPERMATOZOIDES HUMANOS Y SU LIBERACIÓN DESDE LAS CÉLULAS EPITELIALES OVIDUCTALES (CEO) DE BOVINO.(The Fibronectin stimulates human sperm capacitation and release from the bovine oviductal epithelial cells.)Martínez E1, Pérez-Martínez S2, Morales P1-3, Díaz ES1.1 Lab. Biología de la Reproducción, Universidad de Antofagasta, Antofagasta, Chile. 2Lab. Biología de la Reproducción en Mamíferos, CEFyBO-CONICET-UBA, Buenos Aires, Argentina. 3 Instituto Antofagasta, Universidad de Antofagasta, Antofagasta, Chile.Los espermatozoides de mamíferos necesitan atravesar el tracto reproductor femenino, específicamente, el oviducto, para adquirir la capacidad de fecundar a un ovocito. El oviducto es un reservorio funcional de espermatozoides, proveyendo un ambiente para su mantenimiento y competencia. Se ha sugerido que moléculas oviductales podrían modular la función espermática y la capacidad fecundante, como la FN, glicoproteína de la matriz extracelular que se une a la integrina 5β1. El objetivo del trabajo fue evaluar el efecto de Fn sobre la capacitación y la liberación de espermatozoides humanos desde CEO. Para ello, alícuotas de espermatozoides móviles fueron incubados por 1 y 60 minutos en diferentes condiciones: 1) Medio no capacitante (MNC); 2) MNC+Fn [100 µg/ml]; 3) Medio capacitante reconstituido (MCR); 4) MCR+Fn [100 µg/ml]. En estas alícuotas se evaluó: el estado de capacitación por clortetraciclina (CTC), el estado acrosomal por PSA-FITC/Hoechst 33258, liberación de espermatozoides desde co-cultivos heterólogos y el grado de fosforilación de sustratos de PKA mediante Western blot. Los resultados demuestran que Fn es un estimulador de la capacitación, dado que sólo en un MCR se produce un aumento en el porcentaje de espermatozoides capacitados (p<0,001), lo que se correlaciona con la liberación de los espermatozoides desde las CEO (p<0,05). Además, se observó que el efecto de la Fn es mediado por la integrina 5β1. Asimismo, se observa un aumento del número de espermatozoides reaccionados (p<0,01) estimulados con progesterona. Igualmente, Fn estimula el grado de fosforilación en sustratos de PKA durante la capacitación. Estos resultados sugieren que Fn estimula la capacitación espermática.