La Detección de la integrina α5 (receptor de Fibronectina), el receptor de membrana de progesterona (mPr) aumenta durante la capacitación en espermatozoides humanos

POZO, P.; MARTÍNEZ, EDUARDO; MORALES, PATRICIO; DÍAZ, EMILCE

Viña del Mar

Congreso; XXII Reunión anual Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo; 2011

Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo.

LA DETECCIÓN DE LA INTEGRINA alfa5 Y EL RECEPTOR DE MEMBRANA DE PROGESTERONA (mPr) AUMENTA DURANTE LA CAPACITACIÓN EN ESPERMATOZOIDES HUMANOS.(Integrin alfa5 y membrane progesterone receptor detection rise during capacitation in human sperm).Pozo, P., Martínez, E., Morales, P., Diaz, E.S, Laboratorio Biologia de la Reproducción, Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Antofagasta.En humanos, la estimulación de espermatozoides in vitro con progesterona y fibronectina provoca un aumento cooperativo, en el porcentaje de células reaccionadas. Previamente hemos determinado que existen sub-poblaciones de espermatozoides, que expresan integrina alfa5 y mPr que da cuenta del tipo de respuesta observada. El espermatozoide no capacitado no es capaz reaccionar en respuesta a progesterona ni fibronectina. Objetivo: Determinar si la expresión diferencial de integrinas y mPr en espermatozoides humanos cambia durante la capacitación. Para ello, alícuotas de espermatozoides móviles, seleccionados por Percoll, no capacitados y capacitados durante 5 y 18 hrs fueron utilizadas para determinar el porcentaje de detección de integrina alfa5 y del mPr, además del estado acrosomal. Metodología: los espermatozoides fueron teñidos para citometría de flujo y microscopía de inmunofluorescencia, con anticuerpos anti-alfa5 conjugado con FITC, anti-mPr (como anticuerpo primario) y anti IgG-conjugado con Alexa647 (como anticuerpo secundario). Adicionalmente, otra alícuota de espermatozoides fue estimulada con fibronectina o progesterona y luego se determinó el estado acrosomal, utilizando la técnica de PSA-FITC. Resultados: Fibronectina / integrina alfa5Progesterona / mPrMuestra % de espermato-zoides reaccionados(Promedio ± ES)% de marca para integrina 5(Promedio ± ES)% de espermato-zoides reaccionados(Promedio ± ES)% de marca para mPr(Promedio ± ES)Espermatozoides no capacitados5,25 ± 0,631,61± 0,177,4 ± 0,372,9 ± 0,26Espermatozoides capacitados 5 hrs 10,8 ± 0,877,2 ± 0,4913,8 ± 1,236,8 ± 0,68Espermatozoides capacitados 18 hrs31,8 ± 1,3644,9 ± 3,1534,2 ± 0,8533,8 ± 3,24El porcentaje de detección de la integrina alfa5 y el receptor de progestrona cambia a medida que se capacita, lo que se relaciona con el aumento del porcentaje de espermatozoides reaccionados inducidos por fibronectina y progesterona. Teniendo en cuenta que en el espermatozoide los procesos de traducción y transcripción están inactivos, el cambio detectado podría adjudicarse a cambios conformacionales o variaciones en la distribución sub-celular de las proteínas detectadas en este trabajo.