Cambios en la expresión de integrinas y receptor de progesterona (rPg) durante el proceso de capacitación en espermatozoides humanos

MARTÍNEZ, EDUARDO; POZO, P.; MORALES, PATRICIO; DÍAZ, EMILCE

La Serena

Congreso; XXI Reunión anual Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo; 2010

Sociedad Chilena de Reproducción y Desarrollo.

Cambios en la expresión de integrinas y receptor de progesterona (rPg) durante el proceso de capacitación en espermatozoides humanos(Changes in the expression of integrins and progesterone receptors during human sperm capacitation)Martínez, E ., Pozo, P., Morales, P., Diaz, E.S., Facultad Ciencias de la Salud, Universidad de Antofagasta.Previamente, demostramos que en un eyaculado normal existen subpoblaciones de espermatozoides que expresan diferencialmente integrinas y el rPg. El objetivo de este trabajo fue determinar cambios en la expresión de estos receptores durante el proceso de capacitación espermática. Para ello, alícuotas de espermatozoides móviles, seleccionados por Percoll, fueron capacitados por diferentes tiempos (0, 5 y 18 hr). Luego, 2x106 espermatozoides/ml fueron marcados con diferentes anticuerpos: 1) anti-6 conjugado con PE (subunidad de la integrina que reconoce laminina); 2) anti-receptor de progesterona (como anticuerpo primario) y anti IgG-conjugado con Cy5 (como anticuerpo secundario); o 3) anti-5 conjugado con FITC (subunidad de la integrina que reconoce fibronectina). Se realizó un protocolo de tinción simple. Los resultados fueron analizados por citometría de flujo y microscopía confocal. De manera paralela se determinó en cada alícuota el porcentaje de espermatozoides reaccionados a través de la técnica de PSA-FITC y Hoechst 33258.Los resultados muestran que entre las 0 y 5 hr de capacitación no existen cambios en la expresión de receptores. Sin embargo, el porcentaje de espermatozoides que expresan las integrinas y el rPg aumenta entre las 5 y 18 hr de capacitación.Porcentaje de espermatozoides que expresan integrinas y el rPg durante la capacitaciónTiempo de capacitación% a6% a5% rPg0 hr2,6 %1,2 %1%5 hr3,1 %1,5 %2%18 hr20%10%18%Estos resultados se correlacionan con la capacidad de los espermatozoides de experimentar la reacción acrosómica.