Mapeo antigénico exhaustivo de TSSA (Trypomastigote Small Surface Antigen) de Trypanosoma cruzi

GUADALUPE ROMER; VIRGINIA BALOUZ; LEONEL BRACCO; FERNÁN AGÜERO; CARLOS ANDRÉS BUSCAGLIA

Virtual

Congreso; XXXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2020

Sociedad Argntina de Protozoología

Trypanosoma cruzi puede clasificarse en 6 linajes evolutivos o DTUs (discrete typing units), TcI-TcVI, los cuales presentan diferencias genotípicas, fenotípicas, eco-epidemiológicas y, aparentemente, también clínicas. TSSA es un antígeno de superficie de T. cruzi que presenta variaciones de secuencia entre las distintas DTUs, algunas de las cuales impactan en su funcionalidad biológica y reconocimiento humoral. Esto resulta de interés para el desarrollo de herramientas de serotipificación del parásito en muestras clínicas y/o biológicas. Sin embargo, la baja inmunogenicidad de algunas isoformas de TSSA y la similitud de secuencia entre otras, son características a resolver para optimizar la resolución y especificidad de las mismas. En el laboratorio se validó previamente a TSSAII, la isoforma expresada por TcII, TcV y TcVI, como antígeno para serodiagnóstico. Utilizando microarreglos de péptidos de 15 residuos (15mer) mapeamos una región inmunogénica en TSSAII, formada por varios epitopes B lineales parcialmente solapados. En este trabajo, re-evaluamos dicha región utilizando 177 péptidos más cortos (8mer a 13mer), lo que nos permitió identificar al menos dos epitopes discretos. También, para explorar las causas del reconocimiento cruzado y de la baja inmunogenicidad de algunas isoformas, evaluamos la reactividad de un panel de 1554 péptidos quiméricos, en los que 1 a 10 residuos presentes en la secuencia de TSSAII original fue(ron) reemplazado(s) por el(los) presentes en alguna de las otras isoformas de TSSA identificadas en la naturaleza. Este análisis nos permitió observar la existencia de posiciones clave para el reconocimiento antigénico de TSSAII y obtener una mayor resolución epitópica para la discriminación entre isoformas. La integración y ampliación de estos resultados nos permitirá explotar al máximo la variabilidad de TSSA como marcador de serotipificación tanto para el mejor diagnóstico y manejo de los pacientes como para ensayos eco-epidemiológicos.