Comparación de dos métodos para reducir la fragmentación del ADN espermático

MO LIHONG; CORREA, LOURDES; URIONDO HEYDY; LÓPEZ OSA DIEGO; ALVAREZ SEDÓ CRISTIAN; SUELDO CARLOS

Buenos Aires

Congreso; XVIII Congreso Argentino de Medicina Reproductiva; 2018

Sociedad Argentina de Medicina Reproductiva

OBEJTIVO: La preparación de espermatozoides y la capacidad de seleccionar un espermatozoide viable normal son factores importantes en el éxito de la inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI). Estos desempeñan un papel clave debido a que el ICSI omite algunos aspectos de la selección natural del ovocito, por lo que podría inadvertidamente introducir un genoma paterno defectuoso. Tradicionalmente, la preparación del semen se realiza a través de una centrifugación por gradiente de densidad (DGC) o mediante swim-up. El uso de DGC reduce significativamente los niveles de fragmentación de ADN en comparación con el semen entero. Sin embargo, algunas muestras pueden contener niveles elevados de daño en el ADN después de DGC. Para estos casos, se puede ofrecer un siguiente procedimiento mediante el uso de MACS (Columnas de Anexina V) para ayudar a la selección de los espermatozoides no apoptóticos y así disminuir aún más los niveles de fragmentación del ADN espermático. Sin embargo, el uso de MACS no está permitido en algunos países debido a ensayos clínicos de seguridad pendientes. Por lo tanto, el objetivo del presente trabajo fue comparar la eficacia de la realización de dos DGC consecutivos frente a DGC + MACS sobre la reducción del daño del ADN.DISEÑO: Este es un estudio de tipo experimentalMETODOS: Veinticinco pacientes (25) que se someterieron a TRA en un centro de infertilidad (2018) fueron seleccionados para el estudio. Criterios de inclusión: volumen > 1 mL y concentración > 5 millones de espermatozoides/mL. Las muestras se obtuvieron por masturbación. Después de una licuefacción de 60 minutos, se realizó un análisis básico del semen, seguido por la centrifugación mediante gradiente de densidad (DGC), posteriormente pasando por MACS; en otra instancia luego del DGD se realizó un segundo DGC modificado. Se usó el ensayo TUNEL para evaluar el nivel de fragmentación del ADN en: muestra basal (T0), después del primer DGD (TG1), después de DGC + MACS (TG1 + M) o después del segundo gradiente modificado (TG1+TG2). Se contaron al microscopio 500 espermatozoides para cada grupo. El análisis estadístico se realizó con la prueba t de Student emparejada.RESULTADOS: La edad promedio fue de 38.6 +/- 4.2. Los parámetros seminales se muestran en la Tabla 1. La fragmentación del ADN disminuyó significativamente al comparar el semen puro después del primer gradiente (TG1) (28.1 +/- 12.3 vs. 14.6 +/- 7.4; p