Rol del activador de RhoA-GTPasas, GEF-H1, en cáncer

SCHWEITZER, K.; FERNÁNDEZ CHÁVEZ, L.; BARRERA-LAMAS, N.; GANDINI, N.A.; ALONSO, E.G.; MASCARÓ, M.; PICHEL, P.; RECIO, S.; FÄSSLER, R.; FACCHINETTI, M.M.; CURINO, A.C.; COLÓ, G.P.

Ciudad autónoma de Buenos Aires

Jornada; XXXIV Jornadas Multidisciplinarias del Instituto de Oncología Ángel H. Roffo; 2019

Introducción: Las pequeñas Rho-GTPasas son una familia de proteínas clave en la transmisión de señales provenientes de la matriz extracelular. Estas señales son detectadas por receptores de membrana denominados integrinas y traducidas por efectores intracelulares. Uno de los principales efectores es la pequeña GTPasa RhoA, involucrada en la migración e invasión celular. Su actividad se encuentra finamente regulada por 70 diferentes activadores (GEFs) o inhibidores (GAPs). Estudios recientes han observado un aumento del activador de RhoA, GEF-H1, en distintos tumores.Objetivo: Estudiar las vías moleculares implicadas en la regulación de la activación de Rho-GTPasas por GEF-H1 en cáncer.Materiales y Métodos: Se emplearon biopsias humanas, fibroblastos de ratón así como distintas líneas celulares de carcinoma mamario y tiroides. Para estudiar la activación y modulación de las vías involucradas, utilizamos técnicas de biología molecular, inmunohistoquímica (IHQ), inmunofluorescencia, espectroscopía de masas y generación de líneas knock-out por CRISPR/Cas9.Resultados: Determinamos que GEF-H1 es el mayor activador de RhoA en células que sólo expresan las integrinas αVβ3/5 comparado con otros 11 GEFs detectados. Tanto en biopsias de mama como de tiroides se observó por IHQ aumento en la expresión de GEF-H1 con respecto al tejido adyacente no tumoral (Mann-Whitney U-test p=0,0053; n=58 y p=0,0003; n=52 respectivamente). El bloqueo de la expresión de GEF-H1 en los fibroblastos de ratón alteró la formación de las fibras de estrés y disminuyó el tamaño de las adhesiones focales involucradas en la migración celular. Para confirmar estos resultados en células tumorales mamarias hormono independientes (LM3, murinas), se bloqueó la expresión de GEF-H1 y observamos una disminución en la proliferación (p