Estudio del activador de RhoA GEF-H1, como posible biomarcador en cáncer de tiroides

BERMÚDEZ, V.; FERNÁNDEZ CHÁVEZ, L.; ALONSO, E.G.; SCHWEITZER, K.; CARBALLIDO, J.A.; ROSEMBLIT, C.; CAMPOS HAEDO, M.N.; MASCARÓ, M.; RECIO, S.; FERRONATO, M.J.; FERMENTO, M.E.; ALONSO, E.N.; FACCHINETTI, M.M.; CURINO, A.C.; COLÓ, G.P.

Ciudad autónoma de Buenos Aires

Jornada; XXXV Jornadas Multidiciplinarias del Instituto de Oncología Ángel H. Roffo; 2022

Instituto de Oncología Ángel H. Roffo

Introducción: GEF-H1 es uno de los principales activadores de la GTPasa RhoA, cuya sobreexpresión se ha demostrado asociada al desarrollo de distintos tipos de cáncer. En cáncer de mama hemos observado que GEF-H1 se encuentra implicado en los procesos de remodelación del citoesqueleto, migración y proliferación celular, así como en el desarrollo tumoral. No obstante, aún no se ha estudiado su rol en la progresión del cáncer de tiroides (CT), la neoplasia endocrina más prevalente y con una incidencia en aumento. Objetivo: Estudiar la expresión de GEF-H1 tanto in silico como in vitro en biopsias de tiroides humanas. Estudiar los efectos en los procesos involucrados en el desarrollo tumoral al inhibir la expresión de GEF-H1 en una línea celular de CT.Materiales y Métodos: Se emplearon biopsias humanas y líneas celulares de CT. Se utilizaron herramientas bioinformáticas y los datos transcriptómicos se analizaron con lenguaje R (Gene Expression Omnibus). Utilizamos el sistema CRISPR/Cas9 para generar clones knock-out (KO) para GEF-H1 en la línea de carcinoma papilar de tiroides (TPC-1) con dos guías de RNA distintas y el control se transfectó con el vector pX459 (sin guía). Estudiamos mediante inmunohistoquímica (IHQ), western blot (WB), ensayos de proliferación, migración e invasión el efecto de anular GEF-H1 en CT.Resultados: Mediante análisis bioinformático observamos que GEF-H1 se encuentra sobre-expresado a nivel de ARNm y de proteína en tejido tumoral (TT) comparado con el tejido normal (TN). Determinamos que la expresión de GEF-H1 era significativamente mayor en carcinomas tiroideos papilares y anaplásicos que en TN (p