BECAS
VEAS Vanina Paola
congresos y reuniones científicas
Título:
CUANTIFICACIÓN POR MICROSCOPIA CONFOCAL DE EXPLORACIÓN LASER DE LA ACTIVIDAD ANTIFÚNGICA PRODUCIDA POR NANOPARTÍCULAS DE PLATA SOBRE BIOFILM FÚNGICO
Autor/es:
VEAS, VANINA; QUINTEROS, MELISA; ESTEVES, BELÉN; ALBORÉS, SILVANA
Lugar:
Ciudad Autónoma de Buenos Aires
Reunión:
Congreso; Congreso Argentino de Microbiología; 2019
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
La incidencia de la infecciones por {Candida} se ha incrementado en la última década, asociada muchas veces a la presencia de biofilms en implantes, prótesis y catéteres; agravado por la frecuente resistencia a los agentes quimioterápicos utilizados en la clínica. Se ha tratado de contrarrestar con dosis más altas de antifúngicos (ATFs) o con terapia combinada, con los riesgos de efectos adversos que esto implica. Por este motivo esta temática requiere la investigación y búsqueda incesante de nuevas drogas antifúngicas. Nuestro grupo de trabajo ha demostrado que nanopartículas de plata (NP Ag) biosintetizadas a partir de {Penicillium expansum} poseen actividad antibiofilm sobre {Candida tropicalis}. El objetivo de este trabajo fue profundizar dicho estudio cuantificando mediante Microscopia Confocal de Exploración Laser (MCEL) distintos parámetros de la topografía y estructuras del biofilm tratado con estas NP solas y combinadas con Anfotericina B (AmB).Se utilizó AmB (50µg/ml), las NP Ag biosintetizadas (13,5nM) y su combinación, sobre biofilm maduro de a {C. tropicalis} NCPF 3111. La formación de biofilm y el correspondiente tratamiento antifúngico se realizó sobre discos de vidrio en microplacas de 12 pocillos. Posteriormente, se eliminó el sobrenadante y las muestras se tiñeron con Calcofluor White (0,05%v/v) el cual tiñe de azul la pared celular y la matriz exopolisacárida del biofilm fúngico. Las imágenes resultantes se procesaron con el programa ImageJ, por el cual se generó la vista del plano XY y ortogonal, y la reconstrucción en tres dimensiones de las distintas condiciones. Además, mediante el software COMSTAT se obtuvieron los siguientes parámetros cuantitativos: biomasa, espesor, coeficiente de rugosidad y distancia de difusión de las condiciones de los compuestos solos y de la combinación NP Ag+AmB. El análisis estadístico se realizó con el programa Infostat mediante ANOVA seguido del test Tukey con nivel de significación p