Caracterización de biopolímeros tipo Escleroglucano según su origen y procesamiento por medio de espectroscopía Raman

MARÍA F. LADETTO; ALEJANDRA L. VALDEZ; OSVALDO D. DELGADO; JOCHEN SCHMID; ROSA M. S. ÁLVAREZ; JULIA I. FARIÑA

Los Cocos

Simposio; XII Simposio Argentino de Polímeros SAP2017; 2017

INSTITUTO DE INVESTIGACION Y DESARROLLO EN INGENIERIA DE PROCESOS Y QUIMICA APLICADA (IPQA) ; (CONICET - UNC)

El escleroglucano es un biopolímero neutro, hidrosoluble del tipo beta -1,3-beta -1,6-glucano, producido pordeterminadas especies fúngicas del género Sclerotium y bajo ciertas condiciones de fermentación. Suspropiedades físico-químicas y biológicas lo hacen atractivo para diferentes industrias (ej. del petróleo,química, farmacéutica, cosmética, alimentaria y agricultura). Este exopolisacárido (EPS) puede ser obtenidopor cultivo sumergido en un medio de cultivo apropiado y bajo adecuadas condiciones operativas.Actualmente se está examinando seriamente las posibilidades de mejorar el rendimiento en escleroglucanopurificado, tanto a nivel pre- como post-fermentación. En este trabajo se evaluó comparativamente laproducción de EPS a escala biorreactor con el mismo medio de cultivo optimizado (MOPT) y bajo similarescondiciones operativas [1] empleando dos cepas seleccionadas de Sclerotium rolfsii (ATCC 201126 y ATCC15205 [2]), y ensayando dos métodos de procesamiento post-fermentación (downstream processing, DSP)para la recuperación y purificación de los respectivos EPSs. En un protocolo DSP se realizó dilución delcaldo con agua destilada, neutralización, calentamiento a 80°C y centrifugación; seguido de la precipitaciónen frío del EPS por adición al sobrenadante de un volumen equivalente de etanol 96° y enfriamiento (5-8°C)overnight. El segundo protocolo DSP fue idéntico hasta la centrifugación, pero posteriormente elsobrenadante enfriado fue agregado gradualmente con agitación mecánica sobre un vaso conteniendo unvolumen equivalente de etanol 96° frío (efecto Weisenberg). Después de repetir dos veces el procedimiento deredisolución en agua y reprecipitación con etanol (1:1, v/v), según cada protocolo DSP, el EPS fuerecuperado (tamiz ASTM 200 μm) y liofilizado. Los EPS purificados se compararon mediante espectroscopiaRaman, evaluando bandas diagnóstico previamente reportadas [3]. A pesar de la gran similitud entreespectros analizados, esta técnica demostró ser lo suficientemente sensible para evidenciar diferenciasrelacionadas a la calidad de los EPS obtenidos y eficiencias de recuperación de los diferentes métodos.