GERMINACIÓN DE SEMILLAS DE SOJA: ROL DE LOS ARNm ACUMULADOS

MONTECHIARINI, N.; DELGADO, L.; PALMIERI, R.; SARCHIONE, F.; ARAUJO, A.; RODRIGUEZ, A.; CERVIGNI, N.; CARRILLO, N.; MORANDI, E.; GOSPARINI, C.

ROSARIO

Congreso; XVII Congreso y XXXV Reunión Anual 2015; 2015

Sociedad de Biología Rosario

El desarrollo seminal está controlado por programas moleculares específicos y, tanto en semillas en madurez fisiológica (MF), como maduras y secas (MS), una importante cantidad de ARNm permanece almacenada en las mismas. En Arabidopsis thaliana, parte de estos ARNm son suficientes para la germinación. En trabajos previos demostramos que el ARNm de una proteína Expansina (EXP) se encuentra presente entre los transcriptos almacenados en los ejes embrionales de semillas de soja (Glycine max L Merr.) en MF y MS, y que sus niveles aumentan durante la germinación. Esta EXP sería parte de un conjunto de biomoléculas responsable de la expansión celular durante la germinación y estaría involucrada en el debilitamiento de las paredes celulares que permiten cambios en la plasticidad en respuesta al ingreso de agua a las células. Los objetivos de este trabajo fueron: i) determinar si ejes de semillas de soja germinan en ausencia de síntesis de novo de ARNm y ii) estudiar la cinética del proceso. Ejes de semillas de soja en MF y MS se incubaron en agua destilada (AD), y en soluciones 100 µM de inhibidores de la transcripción (α-Amanitina, α-Am) y de la traducción (Cicloheximida, Cx). Se calcularon el porcentaje de germinación (%G) y el tiempo para alcanzar el 50 %G (tG50). Para ejes MS se determinó además el peso acumulado relativo al peso inicial (PAR) durante la germinación en AD y α-Am. En AD se registró el 100 %G a las 12 y 18h para MF y MS, respectivamente. En α-Am los ejes en MF lograron el 100 %G a las 29 h, en tanto los ejes MS no superaron el 87,5 %G, alcanzado a las 48 h. En Cx no se registró germinación en ningún caso. Los tG50 de ejes en MF fueron 6 y 25,5 h y los de ejes MS, 9 y 33 h; en AD y α-Am, respectivamente. Para ejes MS, tanto en AD como en α-Am, el PAR mostró un incremento similar durante las primeras 2 h del período de imbibición (Fase 1) y se mantuvo estable (Fase 2) hasta el reinicio del crecimiento del eje embrional (Fase 3) a las 8 y 12 h en AD y α-Am, respectivamente. Luego, el PAR de ejes MS incubados en AD mostró un incremento rápido (PAR=7 en 72 h) respecto al de los ejes MS en α-Am (PAR=2,6 en 72 h). Los resultados con Cx y α-Am indican que, para que la germinación ocurra es necesaria la traducción pero no la transcripción. Por otra parte, los mayores tG50 para la incubación en αAm respecto a AD, indican un retraso en la velocidad de germinación en ausencia de transcripción. A su vez, en α-Am, el mayor tG50 de ejes MS respecto a los de MF sugiere que la deshidratación podría ser responsable de este retraso, alterando la cantidad y/o calidad de transcriptos remanentes. Adicionalmente, los menores PAR para la germinación en α-Am respecto a AD evidencian que la expansión celular fue severamente reducida en α-Am. A partir de estos resultados se postula que, para la EXP identificada, el nivel de ARNm remanente sería suficiente para que la germinación ocurra, y que su síntesis de novo sería requerida para mantener las tasas normales de germinación.