Inseminación artificial a tiempo fijo con semen congelado y refrigerado en bubillas de Argentina

KONRAD J.L; BANDEO A; VALLEJOS N; PONCE P.; CRUDELI G.; MALDONADO VARGAS, P

Asunción

Simposio; X Simposio de búfalos de las Américas y Europa; 2022

Asociación Paraguaya de criadores de búfalos

Inseminación artificial a tiempo fijo con semen congelado y refrigerado en bubillas de ArgentinaKonrad, José Luis1,2; Bandeo, Alexis1,2; Vallejos, Natalia1,3; Ponce, Pablo1,3; Crudeli Gustavo4; Maldonado-Vargas, Pablo11Instituto de Biotecnología de Reproducción Animal (IBRA), Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Nordeste (UNNE), Corrientes, Argentina. 2Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET), Argentina. 3Secretaria General de Ciencia y Técnica, Universidad Nacional del Nordeste (UNNE), Corrientes, Argentina. 4Universidad Nacional del Chaco Austral (UNCAUS). *E-mail: joseluis.konrad.vet@comunidad.unne.edu.arIntroducciónLa inseminación artificial (IA) es una herramienta comprobada para promover la mejora genética en animales de granja, pero debido a las dificultades en la detección del celo (Suthar y Dhami, 2010), esta técnica tiene una aplicación limitada en los rodeos de búfalos. Además, el pequeño número de machos probados en comparación con el ganado vacuno y las bajas tasas de concepción obtenidas en los programas de IA han desalentado a los criadores de búfalos a adoptar esta técnica. Por estas razones, la mejora genética, así como la incorporación de sangre nueva en la especie bubalina está siendo lenta (Barile, 2016). Los programas de sincronización de las ovulaciones permiten manipular la función ovárica posibilitando que el 90% de los animales ovule en un lapso de 24 horas. De esta forma, es posible realizar las inseminaciones de un gran grupo de animales sin detección de celo. Dicha modalidad, en la que generalmente se utiliza semen congelado-descongelado, es conocida como inseminación artificial a tiempo fijo (IATF) (Callejas, 2005).En vacunos, las inseminaciones con semen refrigerado a 5°C tiene como finalidad lograr un máximo aprovechamiento de los machos genéticamente superiores dado que, al no ser sometidos los espermatozoides al estrés que implica el proceso de congelación-descongelación, la dosis inseminante puede ser reducida hasta un 50% (Vishwanath y Shannon, 2000), o también es utilizado semen refrigerado en rodeos de producción de carne con la finalidad de aumentar el porcentaje de preñez en programas de IATF (Linares et al., 2011).La IATF, luego de la sincronización de la ovulación, ha tenido un crecimiento importante en años recientes en la ganadería bubalina (Tovar Breto y Nava Trujillo, 2021). El protocolo para lograr la sincronización de la ovulación y la inseminación a tiempo fijo, denominado Ovsynch, se basa en el uso de fármacos como la prostaglandina F2α (PGF), hormona liberadora de gonadotropinas (GnRH), y gonadotropina coriónica equina (eCG). Este crecimiento se debe principalmente a la posibilidad de establecer una planificación reproductiva en el rodeo e inseminar a un gran número de búfalas en poco tiempo, además, se elimina la necesidad de observar celos y se disminuye la variabilidad en el momento de la ovulación, que es lo que permite la inseminación en un momento específico luego de finalizado el tratamiento hormonal. En bubillas, con buen desarrollo genital, en temporada reproductiva, la respuesta al tratamiento Ovsynch presenta buenos resultados de preñez (Tovar Breto y Nava Trujillo, 2021).El presente trabajo plantea evaluar el uso de IATF con semen congelado-descongelado versus refrigerado en bubillas en la República Argentina.MetodologíaSe realizó IATF en 627 bubillas de las razas Murrah y Mediterráneas de 2,61±0,52 años de edad, una condición corporal de 3,58±0,58 (escala de 1 a 5) y un grado de desarrollo genital evaluado por ultrasonografía de 2,49±0,50 (escala 1 anestro profundo, 2 anestro superficial y 3 ciclante) con semen congelado-descongelado (n=296) y refrigerado (n=331), en cuatro establecimientos ganaderos, ubicados tres en la provincia de Corrientes (1 en al departamento de Itatí y 2 en el departamento General Paz), y uno en la provincia del Chaco (ubicado en el departamento San Fernando). Previo a la sincronización de celos se realizó evaluación ecográfica para determinar el grado de desarrollo genital y se evaluó la permeabilidad del cervix. El protocolo de sincronización de celos para la IATF fue el Ovsynch con agregado de 400UI de gonadotrofina coriónica equina (eCG) (Figura 1). Se utilizó semen de dos reproductores provenientes del Centro Integral de Inseminación Artificial Bubalino (CIIAB) ubicado en Paso Florentín, Corrientes. Las pajuelas de semen congelado-descongelado tenían una cantidad de 40x106±4,4x106 espermatozoides, y las pajuelas de semen refrigerado a 5ºC durante 24 horas una concentración de 30x106±6,5x106 espermatozoides. A los 35 días de las inseminaciones se realizó diagnóstico de gestación por ultrasonografía.Los datos obtenidos fueron volcados en planillas Excel. Con el grado de desarrollo genital inicial y la preñez por tratamiento se aplicó la prueba no paramétrica de Kruskal-Wallis. Figura 1. Protocolo utilizado para sincronización de celos e inseminación artificial a tiempo fijo.Resultados y discusiónLos resultados obtenidos, arrojaron que del total de hembras que resultaron inseminadas, la preñez observada por ecografía treinta y tres días posteriores fue de 50,3% (149/296) para semen congelado-descongelado y de 55,9% (185/331) para semen refrigerado, estas diferencias no fueron estadísticamente significativas (p=0,1918). No se observaron diferencias significativas entre establecimientos (p>0,05), ni entre los reproductores utilizados con las dos variables de pajuelas, siendo para el reproductor 1 de 50% y 58% y para el reproductor 2 de 52% y 54% de preñez para semen congelado-descongelado y refrigerado, respectivamente (p>0,05). Estos resultados son superiores a los presentados por Crudeli et al., (2000) quienes obtuvieron valores de preñez de 38,8%, al igual que los comentados por Baruselli et al., (1997) donde obtuvieron valores de 37,9% para bubillas utilizando el método Ovsynch con semen congelado-descongelado. Los resultados reportados por Felice et al., (2012), tanto para semen congelado-descongelado como refrigerado en vacunos, fueron de 57,3% y 48,6% respectivamente, similares a los reportados en este trabajo con búfalos, si bien estos valores son estadísticamente significativos, las diferencias numéricas siempre se orientan a favor del semen refrigerado. El diseño experimental requiere dividir el eyaculado, probablemente este hecho haga que el número de animales factibles de inseminar en cada caso, resulte insuficiente para que dichas diferencias alcancen significación estadística (Felice et al., 2012).Si bien todas las variables relacionadas con la motilidad del semen y el movimiento progresivo disminuyen durante el período de refrigeración, independientemente del diluyente en uso, la disminución de la temperatura provoca una baja significativa en el metabolismo del esperma, reduciendo las tasas de fructólisis y consumo de oxígeno, la temperatura ejerce una influencia significativa en la supervivencia de los espermatozoides durante el período de refrigeración (Crespilho et al., 2014).ConclusiónUno de los grandes desafíos en la producción bubalina es la mejora de la eficiencia reproductiva y la mejora genética. El manejo reproductivo del rodeo, a través de la IATF utilizando búfalos genéticamente superiores, es una biotecnología a alcance de todos los productores bubalinos de los diferentes estratos. La disponibilidad de semen de machos mejoradores y los buenos resultados obtenidos por esta técnica permiten mejorar la productividad de los rodeos en menor tiempo. AgradecimientosSe agradece el apoyo brindado a la familia Silva-Maier del Centro Integral de Inseminación Artificial Bubalino (CIIAB) por forman parte activa para el desarrollo de este trabajo.Referencias bibliográficasBarile V.L. 2016. Fixed Time Artificial Insemination in Buffaloes. In: Bubaline Theriogenology by Purohit G.N. https://www.ivis.org/library/bubaline-theriogenology/fixed-time-artificial-insemination-buffaloes.Baruselli P. Barnabe R. Barnabe V. Ikeda J. Souza A. Visitin J.A. 1997. Climate fails to affect conception rate of buffalo cows artificial inseminated. In: 5th World Buffalo Congress, Caserta, Italia. p. 776-778.Callejas S. 2005. Control farmacológico del ciclo estral bovino: bases fisiológicas, protocolos y resultados. Parte II. Rev. Taurus 25: 16-35.Crespilho A. Nichi M. Guasti P. Freitas-Dell'Aqua C. Sá Filho M. Maziero R. Dell'aqua J. Papa F. 2014. Sperm fertility and viability following 48h of refrigeration: evaluation of different extenders for the preservation of bull semen in liquid state. Anim Reprod Sci. 146(3-4):126-33. Crudeli G. Perellano G. Zorrilla F. Vargas N. 2000. Inseminación artificial a tiempo fijo en un rodeo de búfalos en la provincia de Corrientes. Cátedra de fisiopatología de la reproducción. Facultad de Ciencias Veterinarias. Argentina.Felice A. Rodriguez Aguilar S Vater A Callejas S. Cabodevila J. 2012. Inseminación artificial a tiempo fijo: comparación del porcentaje de preñez obtenido utilizando semen refrigerado vs congelado/descongelado. XL Jornadas Uruguayas de Buiatría. 193-194.Linares M. Vuaco C. Narbaitz J.M. Díaz T. Cutaia L. 2011. Análisis retrospectivo sobre resultados obtenidos con protocolos de IATF con re sincronización a tiempo fijo y uso de semen fresco en rodeos de cría. Resúmenes del IX Simposio Internacional de Reproducción Animal- IRAC 2011: 346.Suthar V.S. Dhami A.J. 2010. Estrus detection methods in buffalo. Vet World 3(2): 94-96.Tovar Breto L.E. Nava Trujillo H. 2021. Sincronización de la ovulación e inseminación en búfalas de agua. El búfalo de agua. Editorial LID. 151-186.Vishwanath R. Shannon P. 2000. Storage of bovine semen in liquid and frozen state. Animal Reproduction Science 62: 23-53.