ESTUDIOS PRELIMINARES DE LOS EFECTOS GENOTÓXICOS DE METALES TRAZA COMO POTENCIALES FACTORES DE RIESGO PARA LA SALUD HUMANA

MÜLLER, SERGIO; CAFFETTI, JACQUELINE DIANA; KOCIUBCZYK, ALEX IVAN; ARES, ALICIA ESTHER; FENOCCHIO, ALBERTO SERGIO

Posadas

Jornada; Jornadas Cientifico Tecnológicas; 2018

Universidad Nacional de Misiones

El uso creciente de metales en productos industriales y de consumo ha incrementado la preocupación mundial respecto a sus posibles efectos adversos en los sistemas biológicos. Comúnmente los implantes metálicos son utilizados como tratamiento paliativo o permanente en personas que han perdido alguna función a través de enfermedades, accidentes o desgaste natural. En el cuerpo humano algunos metales tienden a bioacumularse y unirse de forma covalente a macromoléculas como proteínas y ADN, pudiendo generar estrés oxidativo, daño en el ADN y problemas en la reparación del mismo. En este contexto, en el presente trabajo se propuso investigar el efecto genotóxico de aleaciones metálicas utilizadas en la elaboración de prótesis artificiales humanas. Para ello, se trabajó con linfocitos humanos en cultivo expuestos a las aleaciones ASTM/F745 (acero inoxidable bajo en carbono) y ASTM/F75 (aleación a base de cobalto). Partiendo de muestras de sangre periférica de 2 voluntarios sanos se procedió al cultivo de linfocitos durante 48 horas a 37 °C. Al cabo de las primeras 24 horas, los cultivos celulares fueron expuestos a extractos de las aleaciones anteriormente mencionadas en proporción 2:1 durante 3 y 24 horas. Se realizaron cuatro repeticiones por cada tratamiento y además se estableció un control negativo con solución fisiológica y un control positivo con Etilmetanosulfonato (120 µl/ml) para cada muestra. Al finalizar el periodo de exposición, se procedió a la cosecha celular para el desarrollo de la técnica de ensayo cometa, de acuerdo al protocolo propuesto por Speit y Hartmann (1999). La genotoxicidad fue evaluada mediante el análisis de 100 células (nucleoides) por tratamiento, clasificando los cometas de acuerdo al grado de daño en 5 clases: clase 0 (sin daño), clase 1(daño mínimo), clase 2 (daño moderado), clase 3 (daño intenso), clase 4 (daño máximo). A partir de estos datos, se calculó el índice medio de daño en el ADN y los resultados se contrastaron estadísticamente con el test ANOVA. En base a los resultados obtenidos, se observó un aumento significativo del índice de daño en el ADN de los linfocitos inducido por ambas aleaciones metálicas con respecto al control negativo a las 24 horas de exposición (p