ANALISIS FILOGENÉTICO DE Ascophaera atra AISLADA DE POLEN COMERCIAL

TEJERINA M.R.; CABANA M.J.; BENITEZ-AHRENDTS M.R.

Jornada; XI Jornada Científico Técnica; 2018

Las  abejas  solitarias  Megachile  rotundata  son  importantes  polinizadores  de cultivos de alfalfa en los países como Estados Unidos, España y Argentina. Las larvas de  abeja solitaria son  afectadas por el hongo  Ascosphaera aggregata y Ascophaera atra  que causa la mortalidad de las colonias.  Las esporas de este hongo permanecen viables durante años en la colmena y son trasportados por las abejas  en  polen.  Analizar  la  relación  filogenética  de  la  cepa  Ascosphaera  atra con otras cepas aisladas y determinar la producción de quitinasas. La cepa de A. atra fue asilada en medio My20 de polen comercial proveniente de España  y  fue  identificada  genéticamente  (KY810495).  En  este  trabajo  se utilizaron  secuencias  en  base  de  dato  NCBI  (GenBank)  para  establecer  la relación  filogenética.  Todas  las  secuencias  fueron  analizadas  usando  BioEdit, antes  de  la  construcción  del  árbol.  El  análisis  filogenético  fue  llevado  a  cabo usando el programa TNT. El análisis incluye cinco secuencias de  Ascosphaera atra  y  como  outgroups  fue  utilizada  la  secuencia  de  Ascosphaera  aggregata (U68323). El set de datos fue reducido, en la búsqueda heurística, se implementó 1000RAS,  guardando  un  árbol  por  TBR.  Para  evaluar  el  soporte  en  la identificación de grupos, se realizó un bootstrap y un análisis de parsimonia de Jack-knifing. Ambos bootstrap y el análisis de Jack-knife incluyen 1000 matrices remuestreadas.  Para  cada  una,  se  realizó  100  ciclos  de    RAS+TBR.    Para  la evaluación de la producción de quitinasas se siguió el protocolo de quitina colidal en medio minimo. Se encontró que la cepa aislada forma un clado monofiletico con A. atra  aislada de Estados Unidos con bootstrap de 81% y de parsimonia de Jack-knifing  de  83%.  En  cuanto  a  la  secreción  enzimática  la  cepa  produce degradación de quitina a los 4 días de cultivo demostrado su viabilidad.  El  pólen  comercializado  contiene  esporas  viables  que  pueden  afectar  a  zonas libres de este entomoatogeno.