Desarrollo de mutantes de Trypanosoma cruzi y evaluación de su capacidad inmunogénica y protectora ante una infección experimental murina

ZABALA, BRENDA A; MESÍAS, ANDREA C; ACUÑA, LEONARDO; PÉREZ BRANDÁN, CECILIA

Corrientes

Congreso; VIII Congreso Argentino de Parasitología; 2019

Asociación Parasitológica Argentina

En este trabajo nos propusimos desarrollar un mutante de la cepa atenuada TCC de T. cruzi, sobreexpresando el epítope inmunodominante TSKB20 perteneciente a la familia de las trans-sialidasas con la finalidad de evaluarlo como alternativa de inmunización. Se realizaron ensayos in vivo, para lo cual se inocularon ratones C57BL/6 con dos dosis espaciadas por 30 días de 5x105 tripomastigotes metacíclicos vivos mutantes o wild type en combinación con coadyuvante Quil-A. A fin de evaluar los niveles de la respuesta inmune generada, se tomaron muestras de suero y bazo -para la obtención de células esplénicas- y posterior determinación mediante ELISA de la producción de anticuerpos específicos y citoquinas pro y anti inflamatorias. Pasada la etapa de vacunación, todos los individuos fueron infectados con tripomastigotes de la cepa virulenta Tulahuen para medir el grado de protección conferido por la inmunización. Se observó un incremento significativo en los niveles de IgG totales anti-T.cruzi en animales inmunizados con el parásito mutante más Quil-A, con una predominancia en la producción del subtipo IgG1. Los valores de las citoquinas evaluadas -IL-10, TNF-α e IFN-ɤ- en sobrenadante de células estimuladas no fueron estadísticamente significativos entre parásitos mutantes y wild type y en presencia o ausencia de Quil-A. La carga parasitaria en ratones inmunizados con parásitos mutantes o wild type sin adyuvante y luego desafiados fue baja comparada a los grupos en que se coadministró Quil-A y controles. Los resultados obtenidos hasta la fecha no nos permiten concluir si la sobreexpresión del epítope TSKB20 mejora la protección conferida ya que no logramos obtener una inmunidad esterilizante. Por otro lado, si bien el coadyuvante Quil-A colabora elevando la producción de inmunoglobulinas, de alguna manera potencia la infección elevando la carga parasitaria en el hospedador, factor a tener en cuenta a la hora de generar formulaciones vacunales para le Enfermedad de Chagas.