ANALISIS DE SARA EN CELULAS MUSCULARES LISAS Y EN EL REMODELADO VASCULAR EXPERIMENTAL

MICOL RUIZ PAEZ; BENJAMÍN THEA DE LA CRUZ; LAUTARO NATALI; XIMENA VOLPINI; CECILIA CONDE; MELINA MARA MUSRI

Córdoba

Congreso; XXII Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2019

Sociedad de Biología de Córdoba

El remodelado vascular (RV) es el resultado de cambios en los componentes celulares y no celulares como consecuencia de diferentes procesos fisiopatológicos. Los cambios estructurales más característicos son la formación de la capa neoíntima y la alteración de la capa media que promueve el engrosamiento del vaso sanguíneo. Las células musculares lisas (CML) de la capa media, son células especializadas que se caracterizan por cambiar de un estado contráctil diferenciado a un estado proliferativo de-diferenciado para poder ejercer su función de regular el tono vascular. Sin embargo, los estados inflamatorios crónicos inducen alteraciones fenotípicas en estas células contribuyendo al desarrollo del RV patológico. Es por ello que estudiar los mecanismos que regulan el cambio fenotípico de CML es importante para comprender la fisiopatología del RV. Smad Anchor for Receptor Activation (SARA) es una proteína intermediaria de la vía de TGF-β que interacciona con proteínas Smad y con el receptor I de TGF-β. TGF-β induce la diferenciación de CML y en ciertas condiciones promueve su proliferación. En este trabajo nos hemos propuesto analizar el rol de la proteína SARA durante la diferenciación de CML. Para ello se desarrolló un modelo in vitro de cultivos primarios de CML derivadas de carótidas de rata adulta. La diferenciación de CML fue inducida por 4 días de contacto celular o por 24h de tratamiento con TGF-β. El modelo de de-diferenciación consiste en el tratamiento de CML diferenciadas con TNF- por 48h. Mediante Western blot se evaluó la expresión de SARA. α-SMA y Myh1 fueron analizadas por inmunofluorescencia (IF). Nuestros resultados preliminares muestran que SARA disminuye en las CML luego de la diferenciación por contacto celular y que aumenta en CML de-diferenciadas tratadas con TNF-. En CML se observó un cambio en la localización de SARA desde el citoplasma hacia el núcleo luego del tratamiento con TGF-β. Además, ensayamos in vivo un modelo de RV de ligación total de la arteria carótida común izquierda (CCI) en ratas. Mediante IF de la CCI se determinó la expresión de las tres proteínas estudiadas previamente in vitro empleando como control la arteria carótida derecha no ligada. En arterias remodeladas se observó menor expresión de SARA en la media respecto a las carótidas control, y una expresión comparable a la media de la arteria control en la neointima de las CCI ligadas. En la neointima la localización nuclear de SARA fue significativamente menor. Estos resultados sugieren que la expresión de SARA aumenta en células con un mayor estado proliferativo, lo cual coincide con el efecto observado en estas células luego del tratamiento con TNF-. Ya que la persistencia del estado proliferativo puede llevar a la inducción de RV, estos resultados aportan al entendimiento de mecanismos aún desconocidos que gobiernan el cambio fenotípico de CML y que son cruciales para el desarrollo de terapias direccionadas al tratamiento de enfermedades que cursen con alteraciones estructurales de la pared vascular.