Caracterización de una cepa competente natural de Escherichia coli aislada de suelo

MUCCI, S; NARDELLI, M; PARMECIANO DI NOTO, G; RAPISARDI, MF; QUIROGA, C; CENTRÓN, D

Salta

Congreso; XLII Congreso Argentino de Genética y III Reunión Regional SAG-NOA; 2013

Sociedad Argentina de Genética

Diversas especies bacterianas son capaces de adquirir ADN exógeno mediante diferentes mecanismos de transformación natural. Poco se sabe sobre las condiciones necesarias para la expresión de la competencia natural en Escherichia coli. Al analizar cepas aisladas de suelo provenientes de sitios de bajo impacto antrópico del Parque Nacional Iguazú, se identificó un aislamiento de E. coli transformante natural. El objetivo de este trabajo es caracterizar los requerimientos de crecimiento y transformación de E. coli 4IgSN1. Para ello, se realizaron curvas de crecimiento comparando la velocidad de replicación del aislamiento 4IgSN1 con las cepas control de E. coli MG1655, BL21 y DH5α, y a diversas temperaturas (25°C, 30°C, 37°C, 40°C y 45°C). Nuestros resultados mostraron que E. coli 4IgSN1 tiene un rango óptimo de crecimiento entre 37°C y 40°C. Por otro lado, se observó que esta bacteria se replica más rápido que E. coli BL21 y DH5 α, pero es más lenta que la cepa MG1655. En paralelo, se evaluó la capacidad de adquirir plásmidos mediante ensayos de transformación por competencia natural. Para ello, se expuso E. coli 4IgSN1 al ADN de un plásmido ColE1, llamado pCR-aadB, que confiere resistencia a gentamicina. Una vez introducido, se realizaron cultivos seriados durante 6 días, y se evaluó el mantenimiento del mismo por PCR. Nuestros resultados mostraron que E. coli 4IgSN1 es capaz no sólo de captar plásmidos ColE1 de forma natural, sino que también puede mantenerlos al menos 6 días, sugiriendo que expresa la maquinaria para la captación de ADN exógeno.