Adaptación de la técnica Simple Sequence Leng th Polymorphism (SSLP) con reactivos locales para el control genético de ratones y ratas endocriadas

FATIMA TORALES; SAMUEL MIÑO; ROCIO LUCÍA TAU; CAROLA FERRECCIO; NATALIA BACHIR; ROMERA, SONIA ALEJANDRA; MAIDANA, SILVINA SOLEDAD

Revista informatica digital de la AACYTAL

AACYTAL

Lugar: CABA; Año: 2021 vol. 47 p. 43 - 51

2718-7683

Uno de los problemas a los que se enf renta la comunidad científica, los bioterios de producción ylas empresas biotecnológicas es la autenticación genética de cepas consanguíneas de ratones yratas utilizadas en la investigación, en producción y control de productos biológicos. Por lo tanto,nos propusimos adaptar, con insumos e inf raestructura local, la técnica de SSLP utilizada internacionalmentepara el monitoreo genético de animales de experimentación, e implementarla comoser vicio en Argentina. Seleccionaron 50 microsatelites (MITs) para diferenciar dos cepas de ratonesy 26 para discriminar también dos de las cepas de ratas. Las reacciones de PCR para f ueronrealizadas según el protocolo sugerido por el fabricante de los reactivos, así como también lascondiciones de ciclado. La electroforesis en gel de agarosa f ue adaptada a las condiciones de nuestrolaboratorio y los productos disponibles en nuestro país. Para la estandarización de la técnicase utilizó el ADN de cepas de ratones BALB/c y C57BL/6; y de ratas BN y SD/RiJ cedidas gentilmentepor el Dr. Benavides. La validación de la técnica se llevó a cabo por dos operarios distintos,utilizando 2 termocicladores diferentes para evaluar la robustez de la misma. Se lograron amplificarexitosamente los 50 SSLP de ratones y 26 de ratas seleccionados, obteniéndose el patrón debandas esperado para los controles utilizados. La técnica realizada con ADN de los controles positivosutilizados mostró ser robusta y 100% repetible, obteniéndose resultados idénticos por operariosdif erentes y en termocicladores dif erentes.