Cultivo de linfocitos de sangre periférica de Rhinella arenarum

AGÜERO R; VASQUEZ GOMEZ M.E; MARSÁ S.M; MORENO L.E

Mar del Plata

Congreso; XLIV Congreso Argentino de Genética; 2015

SAG

Entre las técnicas más utilizadas para la identificación de diversas especies de anfibios, se encuentra la de cariotipos por técnica directa de obtención de cromosomas, que consiste en inyectar a los ejemplares con colchicina, para luego sacrificarlos y así obtener los cariotipos a partir de los tejidos de médula ósea, intestino y testículos. En el presente trabajo se investigó el establecimiento y mantenimiento de cultivos celulares a partir de sangre periférica de Rhinella arenarum. Se utilizaron linfocitos de sangre periférica, que en la mayoría de las especies de este grupo de vertebrados, son las células que se encuentran en mayor cantidad. Se usaron 10 ejemplares adultos de Rhinella arenarum, colectados manualmente en muestreos nocturnos en las inmediaciones del río Chorrillos. La obtención de sangre se realizó por punción cardíaca. A la misma se le aplicó el protocolo de cultivo de linfocitos para humanos pero con modificaciones en las variables: concentraciones de muestra, de fitohemaglutinina y de antibióticos; concentración y tiempo de exposición a colchicina; tiempo de exposición a la solución hipotónica; tiempo, medio y temperatura de cultivo. Una vez obtenidas las células metafásicas se colorearon con Giemsa. Esta técnica resultó una herramienta muy útil ya que facilitó la obtención de un gran número de células y en consecuencia, un índice metafásico muy elevado, sin necesidad de sacrificar a los ejemplares muestreados.