Valoración de técnicas de tinción para el estudio de la morfología espermática en Quirópteros

MIOTTI, MARÍA DANIELA; DIP, ANA SOFÍA; MARTÍN, EDUARDO; MOLLERACH, MARCOS ISMAEL; HERNÁNDEZ, MARCELA BEATRIZ

La Rioja

Jornada; XXXI Jornadas Argentinas de Mastozoología; 2018

Sociedad Argentina para el Estudio de los Mamíferos (SAREM)

Los espermatozoides de los mamíferos son considerados especie-específicos y su morfología ha sido utilizada como un carácter en análisis filogenéticos. En el caso de los murciélagos, a pesar de haberse descripto una gran variabilidad de formas y tamaños de espermatozoides no se encontró una especificidad tan marcada como en otros grupos. La morfología espermática se estudia mediante diversas técnicas de tinción histológica que permiten visualizar las diferentes regiones de un espermatozoide, su morfología y su variabilidad. Cada técnica varía en complejidad y costo, empleando distintos colorantes, reactivos y número de pasos. El objetivo del siguiente trabajo fue el de evaluar diferentes técnicas de tinciones histológicas para el estudio de la morfología espermática en cuanto a complejidad, tiempo y costos versus resultados. Se tiñeron los espermatozoides de 14 ejemplares de murciélagos de las especies: Artibeus planirostris (n=5), Sturnira erythromos (n=3), Molossus molossus (n=4) y Molossops temminckii (n=2) con las coloraciones de Azul de Toluidina, DAPI (4´,6-diamino-2-fenilindol), Fucsina básica, Giemsa, GRAM, Hematoxilina-Eosina, May-Grünwald-Giemsa y Verde Jano. De las ocho tinciones empleadas, el Azul de Toluidina demostró ser la técnica más rápida, de menor costo y mejores resultados para determinar la presencia de espermatozoides en los extendidos y describir su morfología general. Las tinciones que utilizan dos colorantes, por ejemplo May-Grünwald-Giemsa, son más eficientes para diferenciar el núcleo del acrosoma en la cabeza, aunque de mayor complejidad y costo. La tinción fluorescente de DAPI fue la de resultados visualmente más llamativos, pero no aporta información relevante en cuanto a diferenciar las regiones de la cabeza, siendo además la más cara y compleja. En base a los resultados obtenidos recomendamos el uso de Azul de Toluidina y May-Grünwald-Giemsa como las tinciones óptimas para estudios iniciales de morfología espermática en quirópteros.