Avances en la investigación enmarcada como ?Formación y propiedades de aductos covalentes timina-pterina en oligonucleótidos

RIVERA TORRES, ANA MARIA; NEYRA RECKY, JAEL R.; AGUDELO RESTREPO, MARIANA; THOMAS, ANDRÉS HÉCTOR; LORENTE, CAROLINA

Congreso; V Reunión Grupo Argentino de Fotobiología; 2020

La radiación emitida por el sol es capaz de generar daño en el ADN por diferentes mecanismos, en formadirecta o indirecta. En el caso del daño indirecto, un cromóforo o fotosensibilizador absorbe la radiación UVAy visible, generando especies excitadas que reaccionan con las bases del ADN y las modifican (procesosfotosensibilizados) [1]. Dentro de los fotosensibilizadores mayormente conocidos encontramos a las pterinas(compuesto no sustituido: Ptr), las cuales constituyen una familia de compuestos orgánicos heterocíclicospresentes en la naturaleza que se encuentran en muy pequeñas cantidades en los seres vivos desempeñandodiversas funciones esenciales [2].Se ha reportado que Ptr es capaz de producir daño en el ADN a través de reacciones fotosensibilizadas. Bajoradiación UV-A, el estado triplete excitado de Ptr reacciona con las nucleobases por medio de la abstracciónde un electrón para formar un par radical. Dicho daño depende de los potenciales de ionización de cadanucleobase, siendo el orden: Guanina < Adenina < Citosina ~ Timina. En general, todas las nucleobases sufrendegradación fotosensibilizadas tipo I en presencia de O2. En este sentido, guanina (dGMP) es la principalafectada en medios aeróbicos y no se degrada en ausencia de O2. Por otro lado, si bien la timina (dTMP) espoco reactiva, en ausencia de O2 se observó la formación de aductos (Ptr-dTMP(-2H)) por acoplamiento delos radicales PtrH? y dTMP(-H)?. El aducto mantiene un resto de Ptr intacto que conserva sus propiedadesfotofísicas. Por ello, el presente trabajo pretende investigar la formación de aductos sobre diferentessustratos (nucleótidos y oligonucleótidos) y evaluar si la presencia de guanina evita la formación de aductos,en condiciones anaeróbicas y aeróbicas [1].Soluciones acuosas que contenían timina en diferentes sustratos (dTMP y oligonucleótidos), fueronexpuestas a radiación UV-A (longitud de onda de excitación 365nm) en presencia de Ptr (pH 6,0 25°C) durantediferentes períodos de tiempo, bajo diferentes condiciones experimentales: en ausencia y presencia dedGMP, en medio anaeróbico y aeróbico. La reacción fotoquímica fue estudiada por espectrofotometría UVVis,HPLC, fluorescencia, y fotólisis de destello láser (LFP). Los resultados obtenidos indican que encondiciones aeróbicas no hay alteración en el consumo de dTMP por la presencia de dGMP. Por el contrario,en condiciones anaeróbicas disminuye el consumo de dTMP y Ptr, indicando que la presencia de dGMP inhibela formación del aducto. Por otro lado, a partir de los estudios de LFP se observó que la cantidad de radicalguanina formado en presencia de dTMP fue mayor y que se forma en un tiempo mayor al tiempo dedesactivación del estado triplete de Ptr. Los resultados obtenidos indican que el radical catión guanina seforma a partir de la reacción entre dGMP y el radical catión de la dTMP.Bibliografía1-Serrano M. et al, ChemPhysChem 16, 2244, 20152-Lorente C., Thomas, A.H., Acc. Chem. Res., 39, 395, 2006