Detección de tejido linfoide en mucosas de fácil acceso de caprinos para su aplicación en el diagnóstico de scrapie.

GALLARDO, M. JULIÁN; BERMEJO, VIRGINIA; REDONDO, E; BALBIANI, F; MORENO, C; FRANCINELLI, G; SANCHEZ, C; DELGADO, F

Jornada; XXIII REUNIÓN CIENTÍFICO TÉCNICA ASOCIACIÓN ARGENTINA DE VETERINARIOS DE LABORATORIOS DE DIAGNÓSTICO; 2021

Introducción. Las Encefalopatías Espongiformes Transmisibles(EET) son un grupo de enfermedades neurodegenerativasproducidas por priones que afectan al ser humano y a diferentesespecies animales. Son de curso crónico, tienen manifestacionesneurológicas y terminan invariablemente con la muerte de losindividuos afectados, careciéndose a la fecha de un tratamiento.De todas las EET animales, Scrapie o Prurigo Lumbar que afectaa ovinos y caprinos es la de mayor difusión, reportándose elmayor número de casos nuevos por año, y genera barrerascomerciales para pequeños rumiantes. En la Argentina no se hanidentificado casos de Scrapie ni de otras EET animales perofunciona un sistema de vigilancia epidemiológica para estasenfermedades, el “Programa Nacional de Prevención y Vigilanciade las EET de los animales”. El diagnóstico de las EET se basaen la detección post mortem de la proteína priónica anómala(PrPSc) mediante inmunohistoquímica, Western blot o ELISA. Enel caso de Scrapie es posible el diagnóstico ante mortem de laenfermedad dada la particular acumulación temprana de PrPSc entejido linfoide (TL). En este sentido, a diferencia de lo que ocurrecon la Encefalopatía Espongiforme Bovina, Scrapie podríadiagnosticarse en animales vivos durante el periodo temprano deincubación de la enfermedad que suele ser mayor a un año, eincluso antes de que sea detectado en el sistema nerviosocentral. La PrPSc se acumula en los folículos linfoides de tonsilas,ganglios linfáticos y organizaciones linfáticas presentes enmucosas. Por su fácil acceso, se ha propuesto la detección dePrPSc en el TL del tercer párpado, evaluándose también ladetección en biopsias de mucosa rectal.[1, 2] Las muestras demucosa se consideran aptas para este tipo de diagnóstico cuandopresentan 6 folículos linfoides o más.[1] El objetivo de este trabajofue determinar la aptitud diagnóstica de muestras de mucosarectal y conjuntiva de tercer parpado de caprinos para suaplicación en el diagnóstico ante mortem de Scrapie. Esto seríade importancia al momento de evaluar la utilidad del diagnósticoante mortem de Scrapie en el marco de un programa de vigilanciao prevención.Materiales y métodos. Durante la necropsia de 49 caprinos seobtuvieron muestras de tercer párpado y mucosa rectal. Seextrajo el tercer párpado completo el cual fue seccionadolongitudinalmente a izquierda o derecha del eje medio, lugardonde se ubica el tejido linfoide asociado a esta conjuntiva.[1] Parala mucosa rectal se tomaron muestras aproximadamente a 2 cmcraneal a la línea rectoanal con pinza y tijeras. Todas lasmuestras se conservaron en formol bufferado al 10% hasta suprocesamiento. Una vez fijadas, las muestras fueron incluidas enparafina y se obtuvieron secciones de 3 µm de espesor para sucoloración con hematoxilina y eosina, siguiendo procedimientosde rutina. La presencia de TL se evaluó mediante observaciónmicroscópica de las muestras obtenidas de tercer párpado ymucosa rectal. Se realizó un estudio microscópico de laspreparaciones obtenidas, contabilizando el número de folículoslinfoides presentes en cada una de las muestras.Resultados. En 24 de las muestras de mucosa de tercer párpado(49,0%) y en 31 de las muestras de mucosa rectal (63,3%) seencontraron 6 o más folículos linfoides.Discusión. La aptitud diagnóstica de las muestras de mucosa detercer párpado no concuerda con lo reportado por otros autoresque observaron que aproximadamente el 80% de las muestraseran aptas para el diagnóstico[3] mientras que nosotros obtuvimosun 49% de muestras aptas. Esto podría deberse a que nuestrosresultados se obtuvieron principalmente de animales menores de2 años mientras que los individuos evaluados en otros trabajoseran de diversas edades.[3] Las muestras que poseen escaso onulo desarrollo de folículos en el tercer párpado pertenecen aanimales menores de 2 años. Respecto a la mucosa rectal, losresultados obtenidos tampoco coinciden con los reportadospreviamente. El desarrollo del TL podría depender de la edad, osu detección depender de la toma de muestras. Respecto a laedad, en este estudio se analizaron principalmente animalesjóvenes, lo cual podría explicar las diferencias. Respecto al áreade muestreo, las muestras se colectaron siguiendo losprocedimientos descritos previamente,[2] 2-3 cm craneal a la línearecto-anal. Otros estudios realizados en ovinos y cérvidosseñalan que la muestra ideal debe tomarse de 0 a 1 cm a partirdel inicio de la mucosa.[4,5] Debido a que no hay informaciónconcisa sobre TL asociado a mucosa rectal de caprinos, y a queno se ha evaluado la variable edad respecto del desarrollo de estetejido en tercer párpado y recto, se prevé realizar estudiosadicionales.Conclusiones preliminares. Se detectó TL asociado a mucosasde tercer párpado y mucosa rectal de caprinos y se determinó sieran aptas para el diagnóstico ante mortem de Scrapie. Lasmuestras de mucosa rectal demostraron una mayor aptituddiagnóstica que las de tercer párpado, pero aun así no se ajustana los resultados de otros autores. Se prevé ampliar el rango etariode los animales muestreados e incluso modificar el lugar de latoma de muestra en el caso de la mucosa rectal