Estudio de alteraciones cromosómicas en metafases de caninos

CALIRI MARTINA ; FERRÉ, DANIELA MARISOL; LEDDA VALERIA ; GORLA NORA

Rosario, Santa Fe

Jornada; XIV Jornadas de Ciencias, Tecnologías e Innovación; 2020

Universidad Nacional de Rosario

Los linfocitos periféricos humanos son usados para evaluar alteraciones cromosómicas ?invitro? e ?in vivo? inducidas por genotóxicos. De manera comparativa, en medicinaveterinaria sería óptimo validar el ensayo de alteraciones cromosómicas (AC) en caninos,ya que es una especie que convive con las personas, por lo que permitiría evaluar efectosde exposición a genotóxicos ambientales compartidos, y también efectos secundarios defármacos, y evolución de patologías que involucren rearreglos cromosómicos. El objetivode este estudio fue evaluar AC espontáneas e inducidas por el clastógeno mitomicina C(MMC)en linfocitos caninos cultivados ?in vitro?. Se obtuvo sangre con heparina de uncanino macho y una hembra, ambos adultos, en buen estado de salud, sin tratamientosprevios. Se efectuaron cultivos citogenéticos convencionales de linfocitos en suspensión de72 h para obtener metafases, tres controles negativos y tres controles positivos conMMCFreseniusKabi®500 µg/ml. Luego de agregar colchicina durante los 30 min finalesde cultivo, se hipotonizaron, fijaron y colorearon con Giemsa. Se determinó el índicemitótico (IM) en un total de 1000 células por cultivo. Además, se analizaron 100metafasespor cultivopara la búsqueda de AC numéricas y estructurales. Se aplicó un test de t noapareado para cada una de las alteraciones detectadas: Gaps y roturas de cromátida,asociación telomérica, metafases pulverizadas, endoduplicaciones, metafases ?sticky? opegajosas, con un intervalo de confianza del 95% (GraphPadPridm 8.4.3).El IM fue5.13±2.07 para el control negativo y 7.60 ±4.34 para el positivo, sin diferencias lo queindica ausencia de citotoxicidad. La media total deAC fue 5,00 para el control negativo y34,67 en el positivo con una diferencia entre medias ± EEM de 29,67 ± 8,452, p= 0,0247.La AC más frecuente fue metafases con cromosomas pegajosos. Los resultados sonpreliminares en la validación del ensayo en caninos, habilitándonos para estudios deevaluación del potencial genotóxico de principios activos que son xenobióticos de usocorriente en medicina veterinaria, así como también de agentes clastogénicos para elhombre. El ensayo de AC en caninos es relevante dado que muchos de los cánceres que sepresentan en forma espontánea en caninos son comparables con las alteraciones de loscánceres humanos, así como la heterogeneidad genética documentada para los mismos.