Identificación de Proteínas Anómalas por Electroforesis Capilar y PAGE-SDS

ROMERO, MARÍA CRISTINA; GIONCO, SILVANA; BIANCHI, RICARDO; ORÍA, ALEJANDRO

San Carlos de Bariloche

Congreso; 6ª Congreso Nacional Bioquímico CUBRA VI; 2001

Confederación Unficada Bioquímica de la República Argentina - CUBRA

La concentración de Microalbuminuria (MAU) (excreción baja pero anormal de albúmina en orina) es predictiva de enfermedad renal crónica en los enfermos diabéticos y cardíacos. Se la puede clasificar según su perfil electroforético en proteinurias (selectiva y no selectiva), tubular y glomérulotubular. Los perfiles proteicos urinarios estudiados coinciden tanto en Electroforesis homogénea en geles de poliacrilamida-dodecil sulfato de sodio (PAGE-SDS) como en Electroforesis Capilar Zonal (ECZ). En algunos casos los perfiles en PAGE-SDS muestran bandas anómalas imposibles de identificar por éste método. La amplia gama de variantes que nos brinda la EC (combinaciones con SDS como Cromatografía Electrocinética Micelar (MECC), Isoelectroenfoque Capilar (CIEF), etc.) nos brinda una técnica sumamente útil para la identificación de estas sustancias.Objetivo: Identificación por medio de la ECZ de bandas anómalas obtenidas en corridas de rutinas en PAGE-SDS.Materiales: Orinas de pacientes que presentan valores cuantitativos patológicos de Microalbuminuria (MAU>30 mg/l).Métodos: 1)Test Inmunoturbidimétrico para la detección cuantitativa de MAU y marcadores de función renal (urea, creatinina, albúmina humana, glucosa)- Autoanalizador Hitachi 717.2)Electroforesis en PAGE-SDS.3)ECZ.Resultados: Estudios comparativos realizados nos permiten separar la población en estudio en dos grupos bien definidos: aquellos que presentan la banda anómala que persiste en el tiempo, los podemos clasificar como pacientes con mala evolución y aquellos que sólo muestran la banda el primer día postoperatorio, o que su concentración disminuye en el tiempo, como pacientes con buena evolución. El empleo de SDS en el buffer de dilución de la muestra corrida por ECZ ha permitido separar la banda anómala en dos subfracciones más pequeñas una que sale antes que la albúmina y otra después (PM mayor y menor que la albúmina).Conclusiones: Si bien aún no podemos identificar la o las sustancias desconocidas presentes en éstas orinas, hemos podido caracterizar algunos parámetros como solubilidad, pI, PM; como también asociar los resultados obtenidos con la posibilidad de que ésta banda pueda utilizarse como un marcador temprano de la evolución del paciente. Continuamos aún con los esfuerzos en identificar ésta banda.