Electroferograma Capilar Urinario

GIONCO, SILVANA; CASTAGNINO, JUAN MIGUEL

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; II Congreso Argentino de la Calidad en el Laboratorio Clínico - Calilab 2012; 2002

Fundación Bioquímica Argentina

INTRODUCCIONEl electroferograma capilar urinario (ECU) normal puede ser dividido en cuatro zonas delimitadas por la ubicación de diversos analitos identificados en muestras de orina normales y patologicas.Estas zonas son:ZONA I: Hasta urea y creatinina (U+C) se separan farmacos y metabolitos.ZONA II: Hasta la albumina, es la region tipica de aparicion de proteinas y cadenas del suero que filtran.ZONA III: Hipurico (indice de intoxicacion por tolueno), metilhipurico (de xileno),vanillin mandelico (de estireno), ac.homogentisico (de alcaptonuria),y varios otros.ZONA IV: Del acido urico en adelante.OBJETIVODescripcion de un ECU normal y su diferenciacion de aquellos con distintas patologias.MATERIALES Y METODOSEl trabajo fue realizado sobre 200 muestras de orinas normales y patologicas. Las muestras fueron inyectadas sin concentrar prev ia centrifugacion a 3500 rpm. Condiciones experimentales :Equipo :Beckman P/ACE 5500 System equipado con detector UV con arreglo de diodos (PDA registro entre 190-500 nm )Capilar: Sílica 37 cm x 50 µm di, 27 cm al detector (ventana 100 x 800 µm)Buffer : H3BO3 150 mM ph 9.9Voltaje : 7 kV (I= 40 µA)Inyección : Por presión, 2 segundos (0.5 psi aprox.0.6 nl/seg )Temperatura : 20 º CDetección : 214 nmDespués de cada corrida el capilar es lavado con NaOH 0.1 N, H2O di y regenerado con buffer.Todas las soluciones de reactivos y buffers fueron filtradas por membranas de nylon ( 0.2 µm ).RESULTADOSNORMAL: Perfil electroforetico urinario normal presentando sus picos caracteristicos.PATOLOGICO 1: ECU con Proteinuria. Presenta perfil de proteinograma tipico de un suero en zona II.PATOLOGICO 2: ECU con Proteinuria.En zona II aumento de la albumina y/u otros fracciones proteicas globulinas presentes en el suero. Indice de comienzo de dano renal.PATOLOGICO 3: ECU de MIELOMA MULTIPLE. Presencia de proteinas de Bence Jones en zona II.Cadenas anormales pesadas y livianas confirmadas por inmunosustraccion.PATOLOGICO 4: Presencia de fraccion anomala en zona II en paciente post quirurgico.PATOLOGICO 5: ECU de intoxicacion por benceno.Aumento del pico de acido hipurico en zona III.Este tipo de metabolitos presentan espectros caracteristicos que ayudan a la identificacion de la sustancia.CONCLUSIONESLa simple inspeccion visual de un patron electroforetico urinario es usualmente suficiente para distinguir una orina normal de una patologica, asi como es facil ver la gran banda nonoclonal presente en orinas de pacientes con mieloma multiple.Este novedoso metodo, que utiliza orinas sin concentrar es de gran ayuda a la clinica como estudio preliminar, complementario y/o confirmatorio de los vigentes metodos de diagnostico colaborando con la busqueda del control de calidad en el laboratorio clinico.