Diseño de un sensor plasmónico para la detección del virus del dengue mediante el uso de nanoanticuerpos

STEFONI CELINA; BENAVIDEZ LEANDRO; PAVAN MARIA FLORENCIA; IBAÑEZ LORENA ITATI; MURGIDA DANIEL; CASTRO MARIA ANA

Calafate

Congreso; XXIII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2023; 2023

Introducción: Este trabajo es motivado por la creciente necesidad de desarrollar métodos de diagnóstico clínico y monitoreo ambiental que sean sensibles, fiables, eficientes y económicos. En particular, el biosensor en estudio es un nanobiosensor híbrido cuyo sistema de detección es la espectroscopía Raman intensificada por superficies (SERS, por sus siglas en inglés). El biosensor cuenta con una nanoestructura y con un nanoanticuerpo (NAb) como elemento de bioreconocimiento. Un nanoanticuerpo es el mínimo fragmento funcional con capacidad de unión al antígeno con alta especificidad y afinidad. La ventaja del uso de éstos frente al uso de anticuerpos monoclonales es su mayor estabilidad y su menor costo de producción debido a que se pueden expresar en E. Coli.Resultados: La nanoestructura utilizada es una nanoestrella de Au recubierta con Ag (AuNS@Ag), que permite la intensificación de las señales Raman de la molécula sonda adsorbida sobre estas. Las sondas seleccionadas son ácidos mercaptobenzoicos (MBA), tanto 2-MBA como 4-MBA. La nanoestructura (AuNS@Ag) con la sonda ya adsorbida es recubierta con SiO2 y funcionalizada con nanoanticuerpos.Los nanoanticuerpos utilizados son específicos contra la proteína NS1 del virus del dengue. De manera de lograr una mejor reproducibilidad, se ensayaron distintas estrategias de inmobilización mediante la derivatización del elemento de reconocimiento. La estrategia de sensado consiste en depositar la muestra sobre un sustrato de Au funcionalizado con nanoanticuerpos y luego agregar la nanoestructura. En presencia de antígeno en la muestra, la nanoestructura quedará unida a la superficie de Au mediante el antígeno. Por lo tanto, la superficie tendrá la señal SERS de la molécula sonda. Conclusiones: Se realizaron mediciones SERS del sistema descripto con 4-MBA y se logró detectar una concentración de antígeno (0.145 µg/mL) dentro del rango clínicamente relevante (0.04 a 2 µg/mL)1.