Nicotiana glauca induce la muerte celular por apoptosis en las células de rabdomiosarcoma humano.

ALCIBETH YOSELIN PULIDO; NATALIA MARIA FRATTINI; NICOLÁS OLEGARIO BLANCO; LUCIA PRONSATO; LORENA MILANESI; ANDREA VASCONSUELO

Bahía Blanca

Jornada; XXXI Jornadas Científicas Dr. Juan Carlos Plunkett. I Jornada de Residentes; 2023

Hospital Interzonal General Dr. José Penna

Introducción El Rabdomiosarcoma (RMS) es un tumor maligno de los tejidos blandos, frecuente en niños y adolescentes. Se origina en el músculo esquelético normal, a partir de las células miogénicas y es una disrupción en la regulación del crecimiento y diferenciación de éstas. Este tipo de cáncer suele tener un mal pronóstico, especialmente post metástasis, enfatizando la necesidad de nuevos tratamientos. En nuestro laboratorio se ha observado que el extracto liposoluble de una planta cosmopolita de la familia Solanaceae, Nicotiana glauca (N. g.), induce apoptosis en la línea celular de mioblastos murinos C2C12. Esto sugiere un potencial efecto antitumoral del extracto, útil para el tratamiento de trastornos hiperproliferativos. Objetivo Evaluar el efecto de los extractos liposoluble y hexánico de N. g. en la morfología, migración y viabilidad de la línea tumoral de rabdomiosarcoma RD. Aspectos metodológicos Las células RD, fueron tratadas con el extracto liposoluble y el subextracto hexánico en una concentración de 1:1000, respetando el porcentaje final del vehículo (isopropanol 0,001%), durante 1 a 2 horas. Mediante tinción con MitoTracker red (marcador mitocondrial) y DAPI (marcador nuclear) evaluamos la morfología celular luego de los tratamientos. Con el ensayo de la herida se evaluó la viabilidad, crecimiento y división celular. Mediante Western blot, se analizaron los niveles de expresión y localización subcelular de las proteínas β-catenina y Notch 1. Los resultados obtenidos por Western blot se cuantificaron con el programa ImageJ y fueron expresados como porcentajes diferenciales respecto al control. La morfología, la migración y viabilidad fueron analizadas por microscopía de fluorescencia. Resultados Los tratamientos provocaron alteraciones morfológicas típicas de la apoptosis en células RD, observándose un 66% de células apoptóticas respecto al control. El ensayo de la herida mostró que los tratamientos afectaron significativamente la capacidad de división y probablemente de la migración celular, ya que la misma disminuyó un 85% con el extracto liposoluble y un 98% con el subextracto hexánico, respecto al control. Al evaluar la localización subcelular basal de la proteína β-catenina, se observó que en las células C2C12 la localización es citoplasmática y próxima a la membrana, en contraposición con la localización nuclear observada en las células RD. El tratamiento con los extractos en células RD provoca la translocación subcelular de β-catenina del núcleo a la membrana plasmática. Respecto a Notch 1 los tratamientos redujeron su clivaje y la translocación nuclear en las células RD. Conclusiones Podemos concluir que los extractos liposoluble y hexánico de la planta N. g. inducen apoptosis en la línea celular RD afectando la proliferación y migración de éstas. Discusión Los resultados sugieren un potencial efecto antitumoral de los extractos de N. g. en el tratamiento del rabdomiosarcoma. Estos estudios preliminares brindan un importante conocimiento para el desarrollo de herramientas terapéuticas para el tratamiento del rabdomiosarcoma.