El extracto liposoluble de Nicotiana glauca induce la fosforilación de Akt y Hsp27 en la línea celular de rabdomiosarcoma embrionario

NATALIA MARIA FRATTINI; ALCIBETH YOSELIN PULIDO; NICOLÁS OLEGARIO BLANCO; LUCIA PRONSATO; LORENA MILANESI; ANDREA VASCONSUELO

Buenos Aires

Jornada; XII Jornadas de Jóvenes Investigadores; 2023

Universidad de Buenos Aires, Facultad de Ciencias Veterinarias

El Rabdomiosarcoma es un tumor maligno, común en niños y adolescentes. Su origen es el músculo esquelético; surge a partir de alteraciones en la regulación del crecimiento y diferenciación de las células precursoras de la miogénesis. Se caracteriza por su resistencia a la apoptosis, por lo que las terapias oncológicas son poco efectivas.Investigaciones previas en nuestro laboratorio demostraron un efecto apoptótico en células de la línea celular de rabdomiosarcoma embrionario (RD) cuando son expuestas al extracto liposoluble de Nicotiana glauca (N.g).N.g. es una planta arbustiva perteneciente a la familia de las Solanáceas. Especies de esta familia han demostrado tener propiedades farmacológicas.El objetivo de este trabajo consiste en estudiar el mecanismo molecular subyacente al efecto apoptótico observado en las células RD, en respuesta al tratamiento con el extracto de N.g.Las células RD fueron tratadas con el extracto liposoluble de N.g. disuelto en medio DMEM (1:1000) sin suero fetal bovino. Los tiempos de exposición fueron de 1, 2 y 4 horas para los ensayos de Western Blot, y de 15 y 30 minutos para el desarrollo de la inmunocitoquímica. Los resultados obtenidos fueron cuantificados utilizando el programa imageJ expresando los resultados en porcentaje con respecto al control. Se observó un aumento del 51%, 60% y 54% en la fosforilación de Akt, quinasa vinculada a varios procesos de supervivencia celular, en los tiempos de 1, 2 y 4 horas de tratamiento respectivamente. En concordancia, mediante inmunocitoquímica se observó una activación de esta quinasa en tiempos cortos de exposición, 15 y 30 minutos. Además, se identificó un aumento del 20% en la fosforilación, a la hora de tratamiento, de uno de los posibles targets de Akt, FOXO 3a. Éste es un factor de transcripción de genes proapoptóticos y se encuentra en un estado inactivo cuando es fosforilado por Akt. Asimismo, se observó 23%, 29% y 39% de aumento en la expresión y fosforilación de la chaperona Hsp27 durante su exposición al extracto de N.g. por 1, 2 y 4 horas. Estos eventos se encuentran relacionados con la estabilidad del citoesqueleto frente a situaciones de estrés celular.Los datos aquí presentados indican que en la línea celular RD se activa un mecanismo de defensa mediado por Akt, FOXO 3a y Hsp27, como primera respuesta a la acción apoptótica de el extracto liposoluble de N.g. Dichos resultados son de utilidad para el descubrimiento de targets moleculares a los cuales podrían ir dirigidos componentes obtenidos de N.g. en futuras terapias.