El sistema de dos componentes ActJK de Ensifer meliloti está involucrado en la resistencia a estrés por zinc y cobre

CAFIERO, JUAN HILARIO; VACCA, CAROLINA; LAGARES, ANTONIO; DEL PAPA, MARÍA FLORENCIA

Evento virtual

Congreso; Congreso Argentino de Microbiología Agrícola y Ambiental; 2021

Ensifer meliloti establece una asociación simbiótica con leguminosas del género Medicago, Melilotus y Trigonella, donde forma nódulos con capacidad de fijar N2. Las bacterias utilizan sistemas de dos componentes (TCS) para detectar y adaptarse a las condiciones ambientales. Estudios previos demostraron que el TCS ActJK de E. meliloti está involucrado en la tolerancia a estrés ácido y que también participaría en la resistencia a altas concentraciones de zinc y cobre. Estas condiciones adversas pueden ser encontradas por el rizobio tanto en su vida libre como durante la asociación simbiótica. El operón que codifica para ActJK en condiciones de estrés incluye a degP1 que codifica para una proteasa involucrada en la degradación de proteínas mal plegadas en el periplasma. El objetivo del presente trabajo fue analizar el rol que cumple ActJK en la adaptación a estrés por metales. En primer lugar, se determinó que el promotor de degP1 en la cepa salvaje (wt) presenta una inducción dosis-respuesta en concentraciones crecientes de ZnSO4, utilizando el medio de cultivo definido SG pH 7,0 y fusiones transcripcionales a GFP. La concentración mínima de Zn+2 que activó el promotor de degP1 fue 10 µM. A continuación se evaluó, utilizando la misma metodología, la especificidad de esta inducción analizando el efecto de los siguientes metales: Mn, Fe, Co, Ni, Cu, Zn y Al en concentración 10 µM. Únicamente la presencia de Cu+ o Zn+2 produjo una activación significativa del promotor de degP1 en comparación a la condición control (p