El efecto de la toxina ShlA de Serratia sobre la autofagia y egreso bacteriano de células CHO depende de la señalización purinérgica acoplada a activación de integrina

TUTTOBENE, MARISEL ROMINA; SCHACHTER, JULIETA; ALVAREZ, CORA L.; SAFFIOTI, NICOLÁS A.; LEAL DENIS, M. FLORENCIA; KESSLER, HORST; VESCOVI, ELEONORA GARCÍA; SCHWARZBAUM, PABLO JULIO

Capital Federal

Congreso; I Congreso INFIBIOC - "Superando las fronteras de la medicina traslacional"; 2023

INFIBIOC

Serratia marcescens es un patógeno humano oportunista implicado en infecciones intrahospitalarias resistentes a antibióticos. En contacto con la célula epitelial del hospedador y antes de su internalización, Serratia induce una respuesta autofágica temprana que depende completamente de la toxina ShlA. Una vez que Serratia invade la célula eucariota y se multiplica dentro de una vacuola intracelular, la expresión de ShlA también promueve un evento exocítico que permite que las bacterias salgan de la célula hospedadora sin comprometer su integridad. Se demostró que diversas toxinas, incluida ShlA, inducen la salida de ATP de las células eucariotas. En este trabajo, demostramos que ShlA desencadenó una liberación no lítica de ATP de las células CHO. Por su parte, la eliminación enzimática del ATP extracelular acumulado (eATP) o el bloqueo farmacológico del receptor purinérgico P2Y2 (con afinidad por eATP) inhibieron la respuesta autofágica promovida por ShlA en células CHO. A pesar de la degradación de eATP por ectonucleotidasas de las células CHO, la concentración efectiva y el perfil cinético de eATP fueron consistentes con la afinidad nanomolar del receptor P2Y2 y la cinética conocida de inducción de autofagia. Además, la eliminación de eATP por enzimas exógenas o la inhibición farmacológica del receptor P2Y2 suprimieron la expulsión exocítica inducida por ShlA de las bacterias de la célula hospedadora. Asimismo, el bloqueo de la integrina α5β1 de células CHO inhibió altamente la autofagia dependiente de ShlA, un resultado consistente con la transactivación de α5β1 por el receptor P2Y2. En resumen, el eATP opera como la molécula de señalización clave que permite a la célula eucariota detectar el desafío impuesto por el contacto con la toxina ShlA. La estimulación de las vías dependientes de P2Y2 evoca la activación de una respuesta defensiva para contrarrestar el daño celular y promueve la eliminación no lítica del patógeno de la célula infectada.