Desarrollo de modelos experimentales de melanoma para el estudio de tratamientos binarios y nano-formulaciones in vitro

CASCARDO, C; CAMMARATA, A; GLISONI, RJ; GIORDANO, L; TAVERNA PORRO, M; DURÁN, H

Encuentro; Reunión Anual del Instituto de Nanociencia y Nanotecnología 2021; 2021

Instituto de Nanociencia y Nanotecnología (INN)

El desarrollo de agentes terapéuticos contra el cáncer se ha focalizado tradicionalmente en lainhibición del crecimiento de las células proliferativas del tumor. Sin embargo, en muchos casosse genera resistencia y recurrencia tumoral. En los últimos años, el fracaso de las terapiasconvencionales contra el cáncer ha sido atribuido a la existencia de células madre tumorales(CSCs). Estas células se caracterizan por encontrarse en estado quiescente, presentar altadependencia al metabolismo oxidativo mitocondrial y ser resistentes a las radio y quimioterapias.Por otro lado, el uso de herramientas nanotecnológicas permite el direccionamiento de fármacoshacia el tumor de forma específica, mejorando su farmacocinética y reduciendo los efectosadversos. En este contexto, nos proponemos generar modelos celulares que permitan el estudiode estrategias terapéuticas dirigidas a las CSCs. Se utilizarán las líneas celulares de melanomahumano A375, A375-G10, Mel-J y SKMel-28, con distintas características fenotípicas, diferentesensibilidad a la radioterapia y diferentes niveles de expresión del receptor de melanocortina 1(MC1R), sobreexpresado en algunos melanomas. En primer lugar, a partir de células A375, sedesarrollará un modelo de sobreexpresión estable de MC1R, a fin de evaluar estrategias dedireccionamiento activo a dicho receptor. Asimismo, se obtendrán modelos celulares de CSCs,mediante técnicas de cell-sorting con marcadores específicos que permitan su identificación yaislamiento (ABCB5, ABCG2, CD44), así como también utilizando metodologías de cultivos 3D(esferoides). Una vez logrados y caracterizados los modelos, servirán para el estudio de diversostratamientos combinados. Por un lado, estudiaremos la disrupción del metabolismo mitocondrialcomo alternativa terapéutica para la eliminación de las CSCs, mediante el uso de nanopartículasde oro (AuNPs) conjugadas con doxiciclina (inhibidor de la biogénesis mitocondrial) y sucombinación con radioterapia. Por otro lado, evaluaremos el comportamiento diferencial entrecélulas proliferativas y CSCs en respuesta a compuestos borados fluorescentes del tipo BODIPYfuncionalizados para su direccionamiento activo a MC1R o incluidos en una nanoformulación denaturaleza polimérica para su posterior estudio como agentes terapéuticos en una terapia binariapor captura neutrónica en boro (BNCT).La resolución de los objetivos aquí planteados permitirá avanzar en la evaluación de estrategiasterapéuticas, como así también sentar las bases para futuros trabajos que se focalicen en estudiarla subpoblación de células madre de melanoma.