EFECTO DEL CR(VI) SOBRE EL CRECIMIENTO FÚNGICO Y LA CONCENTRACIÓN DE PROTEÍNAS DE DOS HONGOS AISLADOS DE LA PROVINCIA DE MISIONES

TATARIN, ANA SILVIA; ARANGUIZ, CAMILA; SADAÑOSKI, MARCELA ALEJANDRA; POLTI, MARTA ALEJANDRA; FONSECA, MARÍA ISABEL

Jornada; Primeras Jornadas Institucionales Inbiomis; 2022

El Cr(VI) es motivo de estudio recurrente debido a los efectos adversos que provoca tanto en la salud humana como en el ambiente. La capacidad de las cepas fúngicas para crecer en presencia de contaminantes como el Cr(VI) está relacionada con la habilidad del hongo de desarrollar mecanismos que le confieran adaptación siendo crucial para su aplicación en biorremediación. El objetivo de este trabajo fue determinar la biomasa, analizar la morfología macroscópica y cuantificar la concentración de proteínas extracelulares de Trichoderma koningiopsis LBM 253 y Penicillium brasilianum LBM 260 en medio de cultivo líquido contaminado con Cr(VI). Para ello se emplearon Erlenmeyers de 100 mL con 20 mL de medio de cultivo Lee modificado esterilizado en autoclave a 105°C durante 20 min y suplementado con 200 mg L-1 de Cr(VI). Para la obtención del inóculo se utilizaron placas de MEA previamente activadas y se resuspendieron las esporas en Tween 80 al 0,1%. Los Erlenmeyers se inocularon con 1 mL de suspensión de esporas (2,4 x 104), se incubaron a 28°C y se tomaron muestras destructivas al día 4, 8 y 12 de incubación. Se realizaron controles de medio de cultivo: con el hongo sin Cr(VI) y con Cr(VI) sin el hongo. Luego de la extracción de cada muestra, el micelio se separó del sobrenadante por centrifugación y se utilizó para la determinación de biomasa. La biomasa de ambos hongos se determinó mediante gravimetría y para la concentración de proteínas extracelulares se empleó el método de Lowry et al. (1951) utilizando una curva de calibración a partir de albúmina de suero bovino (BSA). Todos los ensayos fueron realizados por triplicado y los datos se evaluaron mediante Análisis de Varianza. Ambas cepas estudiadas demostraron ser capaces de crecer en presencia del metal, observándose un crecimiento de biomasa diferente entre ellas. T. koningiopsis LBM 253 registró el mayor crecimiento de biomasa al día 8 de cultivo en presencia y en ausencia de Cr(VI) (p< 0,05). P. brasilianum LBM 260 no presentó diferencia significativa entre los tres días analizados tanto en ausencia como en presencia de Cr(VI) (p>0,05). En cuanto a la observación del micelio a nivel macroscópico se observaron cambios en ambas cepas, siendo más prominente la alteración sobre el micelio de P. brasilianum LBM 260. La concentración de proteínas extracelulares se incrementó en presencia de Cr(VI), para ambos casos, observándose un aumento significativo al día 12 para T. koningiopsis LBM 253 y P. brasilianum LBM 260 con valores de 0,022 mg L-1 y 0,042 mg L-1 respectivamente (p