Estudio de Extractos de Thymophylla Pentachaeta con actividad antifúngica fotosensibilizante

CORDISCO ESTEFANÍA; GARRIDO, MARÍA CLARA; PETENATTI ELISA; SVETAZ LAURA A.; SORTINO MAXIMILIANO

Rosario

Jornada; XIII Jornada de Ciencia y Tecnología; 2019

universidad Nacional de Rosario (UNR)

La candidiasis es la infección fúngica más frecuente en pacientes inmunocomprometidos. Su tratamiento se dificulta debido al bajo número de antifúngicos disponibles y a los inconvenientes que ocasionan en el huésped sumado a su alto costo. Una de las alternativas para su tratamiento es la terapia fotodinámica, que posee ventajas como amplio espectro de acción, baja probabilidad de generación de cepas fotorresistentes, mínimo daño en tejidos del huésped y bajo costo. Esta estrategia utiliza moléculas fotosensibilizantes (MFS), que pueden ser producidas por algunas plantas, y luz de una determinada longitud de onda para inducir un daño oxidativo en microorganismos por especies reactivas del oxígeno (EROs). En trabajos previos de nuestro grupo de investigación se determinó que los extractos hexánico (RH) y diclorometánico (RD) de raíces de Thymophylla pentachaeta variedad belenidium, en combinación con luz UV-A, poseen una importante actividad antifúngica frente a Candida albicans [Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) = 1,95 µg/mL]. Según estos resultados se plantean como objetivos de este trabajo: analizar el contenido de MFS de los extractos activos de T. pentachaeta, determinar los mecanismos fotoquímicos que generan las EROs y evaluar la capacidad de inhibición de factores de virulencia producidos por dicho hongo. Se comprobó que ambos extractos presentan MFS, mayoritariamente los tiofenos: 5-(3-buten-1-inil)-2,2-bitiofeno, 5-(4-acetoxi-1-butenil)-2,2-bitiofeno, 2,2´-5´2´´-tertiofeno y 5-(4-hidroxi-1-butenil)-2,2?-bitiofeno. Tanto RH como RD producen EROs por dos mecanismos, tipo I, generando peróxido de hidrógeno (H2O2) y anión superóxido (O2.-) y/o tipo II, generando oxígeno singlete (1O2), lo que se relaciona con el contenido de MFS en cada extracto. Luego se analizó la inhibición de los factores de virulencia de C albicans a la CIM de los extractos y a concentraciones sub-inhibitorias (CIM/2 y CIM/4). Se evaluó la formación de tubo germinativo, la capacidad de adherencia, la producción de enzimas proteolíticas (proteinasas, fosfolipasas y esterasas) y la formación de biofilm. Tanto RH como RD reducen notablemente la formación del tubo germinativo incluso a la CIM/4 (70-80%). Se observó una disminución de la adherencia entre 90-96% de las levaduras luego del tratamiento a la CIM, y entre 50-60% a la CIM/2 y CIM/4. Se observó inhibición de esterasas y proteinasas a la CIM y CIM/2, no así de fosfolipasas. A su vez se observó que ambos extractos a su CIM producen un 70% de células muertas que previamente estaban formando parte del biofilm. Estos datos proporcionan evidencia de extractos que podrían constituir una alternativa interesante para los tratamientos de candidiasis utilizando la terapia fotodinámica, reduciendo significativamente los inconvenientes para el huésped.