Prevalencia de Virus BK utilizando técnica de Real Time PCR en Pacientes con Transplante Renal de la Provincia de Corrientes, Argentina

ORTOWSKI CINTIA; FLORES VICTOR; FERRINI LEANDRO ADRIAN; FERRINI MARÍA FLORENCIA; SOTO SUSANA

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; XI Congreso Argentino de Virología; 2018

Sociedad Argentina de Virología

INTRODUCCIONEl virus BK es un poliomavirus. Su infección ocurre en la infancia, generalmente, en forma asintomática o con síntomas respiratorios leves, pero puede permanecer latente, en el tracto urogenital, especialmente en riñón. En pacientes con trasplante renal, la inmunosupresión permite que el virus BK se replique en el injerto, ocasionando Nefropatía, responsable de disfunción del injerto renal en pacientes trasplantados. La pérdida de injerto puede ocurrir en 10- 80% de los casos de nefropatía. Estos porcentajes son menores en aquellos centros donde se realiza una vigilancia periódica de infección por virus BK y se instituye un tratamiento precoz.OBJETIVOConocer el grado de prevalencia de virus BK en muestras de orina y plasma en pacientes receptores de trasplante renal en un periodo de 6 meses.MATERIALES Y METODOSSe realizó un trabajo descriptivo retrospectivo en muestras de plasma y orina de 100 pacientes trasplantados renales del Instituto de Cardiología de Corrientes. Los mismos no presentaban signos clínicos de infección renal o nefropatía al momento de realizar el estudio. Se analizaron muestras en el período comprendido entre octubre 2014 a marzo 2015 que ingresaron al Laboratorio Central de Redes y Programas. Se realizó la extracción de ADN viral con columna comercial High Pure Viral Nucleic Acid Kit (Roche) . Las determinaciones Real Time se llevaron a cabo en un equipo CFX 96 BioRad. Para la metodología cualitativa se utilizó primer y sonda que reconocen el gen VP-1 del Virus BK (Randhawa, 2004), siguiendo las condiciones del autor. Para la determinación cuantitativa se trabajó con kit comercial BKV Q-PCR Alert Kit NANOGEN, siguiendo las instrucciones del fabricante. Se registró el Ct (CycleTreshold) de cada una de las determinaciones realizadas por ambas metodologías. Se calculó la carga viral en Genomas Equivalentes / mililitro (GE/mL) a partir del numero de copias virales generados por el equipo. Se realizó la validación del ensayo, considerando un valor de Ct > a 35 como no detectable. Valor de Ct < a 20 se diluyó la muestra para ajustarlo dentro de los rangos de linealidad de la curva.CONCLUSIONES La prevalencia de virus BK en los pacientes estudiados fue de un 32% en orina y de un 8% en plasma, resultados similares a los obtenidos por este grupo de investigación en el año 2010. Solo un 6.2 % de los pacientes con viruria presento valores de carga viral superior a 1x10 7 GE/ml, el cual se asocia con nefropatía por BK. Con respecto a la viremia, el 12.5% de los pacientes presento carga viral superior a 1x10 4 GE/ml, también asociado a nefropatía por BK.Todos los pacientes con viremia presentaron virurias con valores superiores a 10 5 GE/ml.Estos resultados demuestran la utilidad de Real time PCR para un diagnóstico precoz y certero evitando el principal efecto secundario de la infección por BK como la pérdida del injerto. Este trabajo valora la eficiencia de la técnica in house ya que permite realizar un screening, evitando realizar la cuantificación de muestras positivas con valores de Ct elevados. Este trabajo permitió establecer un algoritmo de trabajo junto al cuerpo médico con el fin de mejorar el diagnostico de la infeccion, la definicion de conductas terapéuticas y seguimiento del paciente.