Fitoextractos como potenciales bioconservantes de ensilados

CARRIZO, NI; CARABAJAL TORREZ, JA; GEREZ, CL; SOBERÓN, JR

Córdoba

Congreso; VIII Congreso Internacional de Ciencia y Tecnología de Alimentos (CICYTAC 2022); 2022

El ensilaje es un proceso de conservación de forraje basado en una fermentación láctica que impide que se desarrollen microorganismos contaminantes. En numerosos casos esta fermentación es insuficiente y acontece el deterioro aeróbico en momento de apertura de silo. Las levaduras asimiladoras de lactato, comúnmente del género Candida, Pichia y Zigosaccharomyces, inician el deterioro aeróbico. Recientemente se reportó la aplicación de fitoextractos de plantas con actividad antifúngica en silos evidenciándose el prometedor uso de los mismos. Algunos metabolitos vegetales responsables del efecto inhibitorio son las flavanonas y las saponinas triterpénicas. En base a lo expuesto, los objetivos de este trabajo fueron evaluar la actividad antifúngica de Poligala senega (PS), Quillaja saponaria (QS) y Kalanchoe daigremontiana (KD), aislar y purificar el/los compuesto/s activos. Se recolectaron raíces de PS, corteza de QS y partes aéreas de KD para realizar extractos etanólicos (5% p/v) por maceración. El material soluble extraído se cuantificó por rotaevaporación y liofilización y se calculó su rendimiento. La actividad antifúngica fue evaluada por difusión en agar con discos impregnados de los extractos (concentración 100-400 mg/ml) y un césped de Candida albicans ATCC 10231 en medio Mueller-Hinton agar. Posteriormente, se procedió a la purificación del/los compuesto/s activo/s por fraccionamiento con solventes orgánicos y cromatografías mediante ensayos bio-direccionados. El rendimiento de los extractos etanólicos fue similar en las diferentes especies (0,83% PS, 1,27% QS y 1,87% KD). El extracto etanólico de KD (EEKD), con una concentración de 400 mg/mL, fue el único que presentó un halo de inhibición (diámetro= 14 mm) sobre la cepa fúngica indicadora. Posteriormente, este EEKD fue sometido a fraccionamiento con solventes orgánicos de diferente polaridad (diclorometano, acetato de etilo y n-butanol). La actividad de las fracciones fue evaluada por difusión en placa. La fracción butanólica (BKD) mostró uno de los mayores rendimientos (11,01% respecto de EEKD) y actividad inhibitoria (diámetro de halo=10 mm). Luego, esta fracción BKD fue fraccionada por cromatografía en columna de sílica gel. Las fracciones colectadas se sometieron a una cromatografía en capa fina (TLC) en placas de sílica gel y el uso del revelador p-anisaldehído sulfúrico permitió evidenciar presencia de ácidos fenólicos y terpenos. Se visualizaron tres grupos químicos (G1, G2 y G3), de los cuales G2 fue el que presentó mayor rendimiento (37,46% respecto de BKD) y actividad inhibitoria (diámetro de halo=13 mm). La fracción G2 fue sometida a una nueva separación cromatográfica, utilizando una columna Sephadex LH20. Luego de colectar las fracciones y someterlas a una TLC, se lograron distinguir nuevamente tres grupos químicos (S1, S2 y S3), de los cuales S2 presentó un mayor rendimiento (53,96% respecto de G2) y actividad inhibitoria (diámetro de halo=9 mm). Por TLC y usando como revelador cloruro férrico se puso en evidencia la naturaleza fenólica de los compuestos presentes en S2. En conclusión, el extracto etanólico de Kalanchoe daigremontiana presentó actividad antifúngica sobre C. albicans, cuyo efecto inhibitorio involucra a compuesto/s de naturaleza fenólica.