MODIFICACIÓN DE LA TÉCNICA DE PREPARACIÓN DE MUESTRAS DE Hypogeoccocus spp. (INSECTA: HEMIPTERA) PARA MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA DE BARRIDO UTILIZANDO HEXAMETILDISILAZANO

LÓPEZ, ROCÍO GABRIELA; MELCHERT, ALEJANDRO NICOLÁS; CLAPS, LUCÍA ELENA

Tucumán

Jornada; XIV Jornadas Internas de Comunicaciones Internas en Investigación, Docencia y Extensión; 2019

Facultad de Ciencias Naturales e IML

El género Hypogeococcus Rau (Hemiptera: Coccomorpha: Pseudococcidae), incluidoentre las llamadas ?cochinillas harinosas?, es un grupo de insectos fitófagos que posee11 especies a nivel mundial, de las cuales cuatro se encuentran en Argentinaasociadas a diferentes familias vegetales. Algunas fueron utilizadas como controladorbiológico de cactáceas en Australia y Sudáfrica. Actualmente es una plaga muyimportante (quizás introducida accidentalmente) de cactus nativos de Puerto Rico yotras islas del Caribe. Debido a que estas especies son pequeñas y crípticas, laidentificación muchas veces es errónea. Las técnicas tradicionales para microscopíaelectrónica tienen la desventaja de estropear las muestras de cochinillas haciendodifícil la observación de caracteres taxonómicos. El objetivo de este trabajo espresentar un protocolo modificado para la observación de muestras deHypogeococcus en MEB. Se trabajó con hembras adultas de Hypogeococcus spp.recolectadas en Argentina, Paraguay, Brasil y Estados Unidos y fijadas en alcohol 96°.Las observaciones se realizaron en el ?Centro de Investigaciones y Servicios deMicroscopía Electrónica? (CISME-CONICET) utilizando un microscopio electrónico debarrido (Zeiss SUPRA 55-VP). Se llevó a cabo el protocolo siguiendo los pasostradicionales de limpieza con xilol y acetona, hidratación y deshidratación con bateríasde alcohol y acetona; para el secado, en cambio, se sumergieron las muestras enhexametildisilazano (HMDS) durante cinco minutos y dejándolas secar a temperaturaambiente. Al reemplazar la técnica de punto crítico por el HMDS, se obtuvieronmejoras significativas en las observaciones ya que los ejemplares no presentaronsignos de encogimiento o colapso de la pared del insecto, pudiendo reconocerestructuras clave para la identificación como setas, cerarios, poros, etcétera. Lautilización de xilol y acetona produjo muestras más limpias. Esto permite la correctaidentificación de las especies del género Hypogeococcus y la implementación deestrategias para la conservación de los bosques secos de Puerto Rico.