ANÁLISIS DE MUTACIONES EN EL GEN DE HNF1 ALFA

AP LÓPEZ, SA FOSCALDI, MS PÉREZ, GD FRECHTEL

Congreso; 13 Congreso Internacional del Hospital de Clínicas; 2010

La Diabetes del adulto de comienzo en jóvenes o MODY es un tipo de Diabetes monogénica en la cual los individuos presentan clínicamente un fenotipo heterogéneo de comienzo temprano. Se observan defectos en la secreción de insulina mediada por estimulación de la glucosa a nivel pancreático y genéticamente se presenta con herencia autosómica dominante. Es causada por alteraciones en diferentes genes originándose así distintos subtipos, el subtipo 3 se origina por mutaciones en el gen del factor nuclear hepático 1 alfa que codifica para un factor de transcripción que estimula la síntesis de insulina. Objetivo: El presente trabajo se desarrolló con el objetivo de diagnosticar el subtipo de MODY a un grupo de pacientes clínicamente caracterizados, por medio de técnicas de Biología Molecular, realizar un aporte al conocimiento del tipo de mutaciones presentes en estos individuos y de la prevalencia del subtipo MODY 3 en nuestro país. Materiales y Métodos: Los estudios genéticos fueron realizados sobre una muestra de ochenta pacientes no relacionados, clínicamente caracterizados como MODY en base al criterio recomendado por la A.D.A. ? 2008. Además se analizaron cincuenta individuos controles no relacionados, con niveles normales de glucosa y sin antecedentes familiares de Diabetes. La metodología consistió en la purificación del ADN genómico a partir de sangre periférica, la amplificación de los fragmentos codificantes y las regiones adyacentes de los 10 exones del gen del HNF 1 alfa, un screening de mutaciones por medio de la técnica de SSCP y finalmente la secuenciación de los fragmentos con alteración en la corrida electroforética. Resultados. Como resultado de estos estudios se encontraron ocho mutaciones diferentes en ocho pacientes no relacionados, de las cuales dos habían sido previamente descriptas y las otras resultaron ser noveles. La s mutaciones halladas fueron las siguientesg.858G>T o Glu48Asp (E48D): g.914fsinsGA; g.2707C>T o Arg203Cys (R203C); g.2707C>G o Arg203Gly (R203G); g.3430fsinsC; g.3430delC; g.4848C>T stop o Gln463STOP; g.4962+3insT. En cuanto a las prevalencias relativas podemos decir que son del 10% con respecto a MODY en conjunto. Conclusiones:Objetivo: El presente trabajo se desarrolló con el objetivo de diagnosticar el subtipo de MODY a un grupo de pacientes clínicamente caracterizados, por medio de técnicas de Biología Molecular, realizar un aporte al conocimiento del tipo de mutaciones presentes en estos individuos y de la prevalencia del subtipo MODY 3 en nuestro país. Materiales y Métodos: Los estudios genéticos fueron realizados sobre una muestra de ochenta pacientes no relacionados, clínicamente caracterizados como MODY en base al criterio recomendado por la A.D.A. ? 2008. Además se analizaron cincuenta individuos controles no relacionados, con niveles normales de glucosa y sin antecedentes familiares de Diabetes. La metodología consistió en la purificación del ADN genómico a partir de sangre periférica, la amplificación de los fragmentos codificantes y las regiones adyacentes de los 10 exones del gen del HNF 1 alfa, un screening de mutaciones por medio de la técnica de SSCP y finalmente la secuenciación de los fragmentos con alteración en la corrida electroforética. Resultados. Como resultado de estos estudios se encontraron ocho mutaciones diferentes en ocho pacientes no relacionados, de las cuales dos habían sido previamente descriptas y las otras resultaron ser noveles. La s mutaciones halladas fueron las siguientesg.858G>T o Glu48Asp (E48D): g.914fsinsGA; g.2707C>T o Arg203Cys (R203C); g.2707C>G o Arg203Gly (R203G); g.3430fsinsC; g.3430delC; g.4848C>T stop o Gln463STOP; g.4962+3insT. En cuanto a las prevalencias relativas podemos decir que son del 10% con respecto a MODY en conjunto. Conclusiones:Materiales y Métodos: Los estudios genéticos fueron realizados sobre una muestra de ochenta pacientes no relacionados, clínicamente caracterizados como MODY en base al criterio recomendado por la A.D.A. ? 2008. Además se analizaron cincuenta individuos controles no relacionados, con niveles normales de glucosa y sin antecedentes familiares de Diabetes. La metodología consistió en la purificación del ADN genómico a partir de sangre periférica, la amplificación de los fragmentos codificantes y las regiones adyacentes de los 10 exones del gen del HNF 1 alfa, un screening de mutaciones por medio de la técnica de SSCP y finalmente la secuenciación de los fragmentos con alteración en la corrida electroforética. Resultados. Como resultado de estos estudios se encontraron ocho mutaciones diferentes en ocho pacientes no relacionados, de las cuales dos habían sido previamente descriptas y las otras resultaron ser noveles. La s mutaciones halladas fueron las siguientesg.858G>T o Glu48Asp (E48D): g.914fsinsGA; g.2707C>T o Arg203Cys (R203C); g.2707C>G o Arg203Gly (R203G); g.3430fsinsC; g.3430delC; g.4848C>T stop o Gln463STOP; g.4962+3insT. En cuanto a las prevalencias relativas podemos decir que son del 10% con respecto a MODY en conjunto. Conclusiones:Conclusiones: El desarrollo y aplicación de las técnicas que permiten lograr el diagnóstico de estos subtipos de MODY son necesarias para la instauración del mas efectivo tratamiento en el paciente, para la reorientación del tratamiento en caso necesario, para la predicción de la evolución y además para brindar el consejo genético a sus familiares. Se diagnosticaron y se determinó el subtipo sobre ocho pacientes clínicamente caracterizados como MODY, se establecieron parámetros de prevalencia en nuestra población de este subtipo de MODY y se produjo un aporte a la instauración de un tratamiento más efectivo en estos pacientes en función de su alteración genética específica. Estos resultados contribuyen al mejor entendimiento de una patología que se destaca por su alta frecuencia y su compleja etiología.