Participación del inhibidor de quinasas dependientes de ciclinas, p21Waf1/Cip1, en la respuesta de células madre de gliomas derivadas de pacientes frente a agentes genotóxicos

MORRIS HANON, OLIVIA; SCASSA, MARÍA ELIDA; GOTTIFREDI, V.; MANSILLA, S.; FURMENTO, VERÓNICA ALEJANDRA; FERNANDEZ-ESPINOSA, DAMIAN DARÍO; MARTINETTO, H.; SEVLEVER, GUSTAVO EMILIO; VIDELA-RICHARDSON, GUILLERMO AGUSTÍN

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

Los gliomas de alto grado son altamente agresivos e invasivos. En su progresión producen gran daño neurológico y se incluyen entre los tumores más mortales que existen. Actualmente se propone que los gliomas de alto grado son generados a partir de células madre tumorales (CMT), las cuales corresponden a una subpoblación minoritaria capaz de generar y propagar tumores al ser inyectadas en ratones inmunodeficientes. El cultivo de CMT derivadas de pacientes ofrece la posibilidad de realizar investigaciones traslacionales que contribuyan al desarrollo de terapias personalizadas. El objetivo de este trabajo consiste en evaluar la participación del inhibidor de quinasas dependientes de ciclinas, p21Waf1/Cip1, en la respuesta celular de CMT derivadas de pacientes con gliomas de alto grado frente a agentes que producen daño en el ADN. Para ello utilizamos 5 líneas de CMT, las cuales han sido establecidas y caracterizadas previamente en nuestro laboratorio. En primer lugar, mediante ensayos de viabilidad pudimos observar que las distintas líneas celulares analizadas exhiben una sensibilidad particular frente a tratamientos con diferentes agentes genotóxicos. Realizando técnicas de RT-PCR en tiempo real determinamos que los niveles de expresión del ARNm de p21 son elevados en todas las líneas celulares analizadas y que el tratamiento con temozolamida o camptotecina conduce a un aumento en la expresión de este transcripto. Además, mediante técnicas de inmunofluorescencia observamos que estos agentes promueven la acumulación nuclear de p21, sugiriendo la participación de esta proteína en la respuesta al daño del ADN. Notablemente, al menos en una de las líneas empleadas, el silenciamiento transiente de p21 durante el tratamiento con camptotecina condujo a un aumento en la muerte celular. Estos resultados sugieren que la inhibición de p21 podría constituir un posible blanco terapéutico destinado a reducir la resistencia de estos tumores frente a tratamientos quimioterapéuticos.