Enzimas de Acremonium strictum para la obtención de compuestos polifenólicos con potencial actividad farmacológica

ALINA GONZALEZ; IARA MASILLA; ELIAS PROST; MICAELA BAGLIONI

San Luis (San Luis)

Otro; III Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2018

Sociedad Argentina de Biocatálisis y Biotransformaciones

Las diglicosidasas son enzimas que catalizan la hidrólisis del enlace heterosídico de flavonoides yliberan el disacárido y su correspondiente aglicona en una sola reacción [1]. En el caso de rutina suhidrólisis da como resultado el disacárido rutinosa y el polifenol quercetina.Se cultivaron 28 cepasde los géneros Acremonium y Sarocladium en presencia de los flavonoides hesperidina, diosmina yrutina [2]. Con los dos primeros no se detectaron halos de hidrólisis, mientras que 21 cepas fueroncapaces de hidrolizar rutina. El halo de hidrólisis del flavonoide no indica si la desglicosilación seproduce en una o dos reacciones (fig 1). En un análisis zimográfico con el sustrato 4-metilumbeliferil-rutinósido siete cepas presentaron actividad diglicosidasa. Entre ellas,Sarocladium strictum DMic 093557 presentó la mayor tasa de clarificación de rutina (2.1 mm/día)en medio sólido. En cultivo sumergido, con rutina como fuente de carbono la máxima producciónde actividad desglicosilante (22.4 ± 4.1 U/L) se detectó al octavo día. Se confirmó la actividaddiglicosidasa mediante la identificación de los productos de hidrólisis de rutina (rutinosa yquercetina) y la enzima purificada a homogeneidad presentó un pH óptimo de 6 y unatemperatura de 60 °C.Si bien en las 28 cepas los géneros Acremonium y Sarocladium no seencontraron enzimas específicas para los 7-O-rutinósidos (hesperidina y diosmina), un 25% de lascepas que hidrolizaron rutina fueron potenciales productoras de diglicosidasas para 3-O-rutinósidos. Esto indica que la posición donde está unido el residuo glicosídico juega un papelimportante en la catálisis. La cepa seleccionada (S. strictum DMIc 093557) por su tasa de hidrólisisde rutina en medio sólido, produce una diglicosidasa con potencial aplicación para la producciónde quercetina en condiciones de baja temperatura y pH cercano a la neutralidad.