La falla previa a interferón no altera la frecuencia de variantes de resistencia a inhibidores de NS3 y NS5B en pacientes coinfectados por HIV/HCV

MARIANO SEDE; MICAELA PARRA; NATALIA LAUFER; JORGE QUARLERI

CABA

Congreso; XI Congreso Latinoamericano de Virología y II Congreso Latinoamericano de Virología; 2015

Introducción: Desde el año 2011 el tratamiento de la infección crónica por HCV incluye drogas de acción directa (DAA, de sus siglas en inglés) en combinación con interferón pegilado (peg-INF) y ribavirina (RBV) y posteriormente en esquemas libres de interferón. Las terapias basadas en INF inducen la actividad citotóxica de los linfocitos T dirigida contra los epitopes derivados de la polimerasa (NS5B) y proteasa (NS3) de HCV. Este aumento de la presión inmunológica puede favorecer la selección de variantes capaces de evadir la respuesta inmune. Asimismo, estas variantes virales pueden estar asociadas a resistencia a las DAA (RAVs)Objetivo: Analizar la dinámica de RAVs asociadas a inhibidores de proteasa y polimerasa de HCV que puedan afectar futuros tratamientos en pacientes coinfectados por HCV/HIV con fallo previo a terapia basada en INF.Materiales y Métodos: Se extrajo ARN de muestras de 18 pacientes coinfectados por genotipo 1a de HCV. Las muestras fueron tomadas previo y durante (24hs y semanas 4, 12, 24) el tratamiento con peg-INF y RBV. Se realizó secuenciación ultraprofunda (454 FLX, Roche) sobre los productos de NS3 y NS5B obtenidos a partir de la RT-nested PCR. Dos medidas de diversidad genética fueron utilizadas para comparar las poblaciones virales: diversidad nucleotídica (π) y el estadídtico D de Tajima.Resultados: De la población en estudio, el análisis de secuencias nucleotídicas implicó un total de 63674 para NS3 y 48127 para NS5B. Tanto en NS3 como en NS5B se detectaron RAVs en muy baja frecuencia (< 5%) en muestras de todos los individuos pero en general su presencia no fue constante durante el seguimiento. Sólo en una muestra de dos pacientes se observaron variantes mayoritarias exhibiendo la Q80R/K/L (asociada a resistencia a simeprevir) y la A421V (asociado a resistencia a baclabuvir). Se obtuvieron valores negativos estadísticamente significativos para el estadístico D en ambas regiones, pero no se observaron diferencias significativas entre las muestras de los distintos tiempos como tampoco para los valores de π. Conclusiones: La falla a una terapia previa con peg-INF/RBV no se asoció con un aumento de la frecuencia de RAVs que afectan a drogas que actúan a nivel de NS3 o NS5B. Los valores obtenidos para π y D podrían asociarse al exceso de polimorfismos en baja frecuencia, los cuales a su vez ocasionalmente podrían portar RAVs. Sin embargo son seleccionados negativamente y en consecuencia fluctúan a baja frecuencia e incluso desaparecen, lo cual concuerda con el comportamiento observado para las RAVs en ausencia de presión de selección por las drogas antivirales de acción directa.