Infecciones respiratorias asociadas a Mycoplasma pulmonis y Cilia-Associated Respiratory Bacillus en ratas de laboratorio: diagnóstico e importancia de la enfermedad.

SACCO, S.C.; BELOTTI, E.M.; NOTARO, U.; PAUTASSO, C.; BERTONA, J.; SALINAS, F.; CANAL, A.M.; REY, F.; SALVETTI, N.R.; ORTEGA, H.H.

Jornada; V JORNADA DE DIFUSIÓN DE LA INVESTIGACIÓN Y EXTENSIÓN; 2017

Mycoplasma pulmonis es una bacteria gram negativa, carente de pared celular y agente causal de laMicoplasmosis Respiratoria Murina (MRM). El Cilia-Associated Respiratory Bacillus (CARB) es unabacteria gram negativa, filamentosa y argiofilica. Ambos son patógenos primarios del aparatorespiratorio de ratas y se los ha asociado a Enfermedad Respiratoria Crónica (CRD) que afectadiferentes especies de roedores. Aunque la CRD es a menudo el resultado de la co-infección de CARBy M. pulmonis, cada uno de estos agentes puede encontrarse en infecciones individuales, resultando enenfermedades similares3. Los animales destinados a fines experimentales deben tener un estadosanitario apropiado, y los requisitos para asegurar la calidad de estos estudios se encuentranestablecidos internacionalmente. M. pulmonis es un importante patógeno respiratorio de ratas delaboratorio, es transmitido verticalmente y por aerosoles1. A nivel mundial, este patógeno producepérdidas millonarias tanto en la industria farmacéutica como en los centros de investigación4. CARBes transmitido por contacto directo, usualmente durante el periodo neonatal. Las poblaciones deroedores pueden ser rutinariamente monitoreadas por Micoplasma y CARB mediante serología(ELISA, MFIATM o IFA). Los hallazgos clínicos y las lesiones histológicas pueden ayudar endiagnósticos de Micoplasmosis avanzadas; sin embargo, el cultivo y PCR son los métodos de elecciónpara detectar infecciones tempranas. Se utiliza PCR y/o histopatología para detectar CARB enanimales con enfermedad clínica. El diagnóstico definitivo de CARB puede realizarse mediante laobservación de las lesiones histopatológicas características y la coloración con una tinción de plata delepitelio respiratorio para demostrar la presencia de la bacteria entre las cilias. El objetivo de estetrabajo es describir las lesiones anatomopatológicas frecuentemente asociadas a M. pulmonis y CARB,y destacar la importancia de su diagnóstico y control en las colonias de ratas destinadas aexperimentación.Se emplearon 3 ratas, Wistar CMedC, del área de producción del Centro de Medicina Comparada delICiVet Litoral. Dos animales (A1 y A2), machos, de 45 días de edad, no presentaban signos clínicosde enfermedad; el tercer animal (A3), macho, de 15 meses de edad, presentaba un cuadro respiratoriocrónico con disnea, anorexia, pérdida de peso, pelo hirsuto y perdida de condición corporal. Se realizóla necropsia y se tomaron muestras de las lesiones pulmonares para diagnóstico histopatológico, lasmismas fueron fijadas en formol bufferado 10%, procesadas mediante técnicas de inclusión enparafina y coloreadas con hematoxilina-eosina. El diagnóstico clínico y anatomopatológico fuerealizado por Médicos Veterinarios capacitados especialmente en sanidad y patología de animales delaboratorio. Se realizó la tinción argéntica de Levaditi como técnica complementaria para eldiagnóstico.Macroscópicamente en A1 y A2 se observaron lesiones focalmente extensas, de diferentes tamañosque tendían a coalescer, de distribución asimétrica cráneo-ventral, blanco amarillentas, querepresentan bronquíolos dilatados con exudado muco-purulento y abscedación. En el animal A3, alrealizar la apertura de la cavidad toráxica, el pulmón no colapso, y se observaron lesiones similares,pero de mayor severidad, de distribución difusa y con marcada bronquiectasia multifocal, áreas de atelectasia, hemorragia y fibrosis difusa; y abundante exudado supurativo y mucoso al corte yocupando los espacios aéreos en tráquea y bronquios. El diagnóstico morfológico fue bronconeumoníasupurativa multifocal a coalescente, crónica, severa, con bronquiectasia y bronquioloectasia. Laslesiones microscópicas correspondían con una bronconeumonía supurativa multifocal, severa, concuffing peribronquial y peribronquiolar de linfocitos y plasmocitos. En los animales A1 y A2,multifocalmente se observan infiltrados leucocitarios mixtos con predominio de neutrófilos, algunosdegenerados, numerosos macrófagos activados y un material homogéneo fibrilar levemente basófiloen lúmenes alveolares. Hiperplasia de células caliciformes y epitelio bronquiolar en algunas zonas,con atenuación, necrosis y desciliación en otras. Se observaron bacilos, basófilos, de aproximadamente0.5 x 8 µm entre los cilios y el exudado de fibrina y neutrófilos en el lumen de un bronquíolo. En elA3 se observaron lesiones similares, más severas, con bronquíolos distendidos con exudado depolimorfonucleares neutrófilos, muchos degenerados y con marcada atenuación del epitelio. Severaproliferación de tejido conjuntivo intersticial con numerosos infiltrados leucocitarios mixtos delinfocitos, plasmocitos y macrófagos, severa hiperemia y hemorragias multifocales. Estos hallazgosfueron compatibles con la presencia de M. pulmonis o CARB.Las co-infecciones por estos agentes son muy comunes y las lesiones asociadas a estos patógenos sonmuy similares e histológicamente indistinguibles. Se ha descripto que la prevalencia de MRM varia deun 20% a 60% en colonias con barreras de bioseguridad y está cerca del 100% en coloniasconvencionales2. En Argentina no existen datos publicados respecto a la prevalencia y medidas decontrol de estos agentes en los bioterios de ratas destinadas a experimentación. Según la informaciónpublicada por el laboratorio internacional ?Charles River? M. pulmonis podría tener una potencialinterferencia con una amplia variedad de estudios, y los animales con signos de CRD por CARBgeneralmente no se encuentran en buena forma para su uso en investigación. Por lo tanto, el rápido yeficiente diagnóstico de la presencia de estos patógenos en las colonias de animales destinados aexperimentación es esencial para garantizar la calidad de los resultados de los estudios experimentales.Cabe destacar la importancia de la presencia de Médicos Veterinarios capacitados y especializados entrabajo con animales de laboratorio, como un pilar esencial para el control de estas y otrasenfermedades que puedan afectar las colonias.